1,25-(OH)2VitD3對高糖誘導人腎小管上皮細胞UCP2表達及氧化應激的影響.pdf

1、目的:觀察1,25-(OH)2VitD3對高糖誘導的人腎小管上皮細胞(HK-2)中活性氧(ROS)、線粒體膜電位(ΔΨm)、總超氧化物歧化酶(T-SOD)活力、解偶聯(lián)蛋白2(UCP2)表達的影響,探討其在糖尿病腎病(DN)氧化應激中的作用。
　　方法:體外培養(yǎng)的HK-2細胞分為正常對照組(NG)、高糖處理組(HG)、高滲對照組(MG)、高糖培養(yǎng)液中加入不同濃度的VitD3(V1組10-9mol/L、V2組10-8mol/L、V3組

2、10-7mol/L),并設置N-乙酰半胱氨酸藥效對照組(NAC)及無水乙醇溶劑對照組(SG)。觀測胞內ROS熒光強度、線粒體膜電位的變化,并進一步檢測細胞UCP2mRNA、蛋白表達情況以及各組細胞中T-SOD活力和丙二醛(MDA)水平。
　　結果:(1)HG組ROS熒光強度較NG組明顯升高,而V1組與NAC組熒光強度均較HG組減弱;(2)HG組細胞的ΔΨm顯著低于NG組(P<0.01),應用1,25-(OH)2VitD3和NAC后

3、,兩組ΔΨm與HG組比較顯著下降(均P<0.01);(3)HG組T-SOD活力顯著低于NG組(P<0.01),而MDA水平顯著高于NG組(P<0.01);加入不同濃度的1,25-(OH)2VitD3三組(V1、V2、V3)較HG組T-SOD活力均顯著增高(均P<0.05),而MDA水平均顯著低于HG組(均P<0.01),且均呈劑量依賴性;(4)在NG組正常培養(yǎng)的HK-2細胞即存在UCP2mRNA和蛋白的表達。HG組培養(yǎng)24h后UCP2m

4、RNA表達即升高,培養(yǎng)72h后HG組UCP2mRNA表達與NG組比較顯著增加(P<0.05);在HG組細胞中同時加入不同濃度的1,25-(OH)2VitD3處理72h后,UCP2的基因和蛋白的高表達與HG組比較顯著降低(均P<0.01),且呈劑量依賴關系。
　　結論:(1)高糖可誘導體外培養(yǎng)的HK-2細胞氧化應激損傷;(2)1,25-(OH)2VitD3可能通過降低ΔΨm、ROS生成及調節(jié)胞內UCP2表達抑制高糖誘導的氧化應激反應