膽固醇水平在滋養(yǎng)細(xì)胞微粒導(dǎo)致子癇前期過程中的影響.pdf

1、目的：
　　觀察不同濃度膽固醇對滋養(yǎng)細(xì)胞壞死凋亡及尿酸產(chǎn)生的影響，以比較不同膽固醇水平培養(yǎng)滋養(yǎng)細(xì)胞產(chǎn)生的微粒對臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的作用以及對血管內(nèi)皮素產(chǎn)生的影響，進而探討膽固醇水平在滋養(yǎng)細(xì)胞微粒導(dǎo)致子癇前期發(fā)病過程中的作用，為通過改變飲食習(xí)慣降低子癇前期發(fā)病率提供一定的理論支持。
　　方法：
　　(1)用不同膽固醇濃度培養(yǎng)基培養(yǎng)滋養(yǎng)細(xì)胞（HPT-8系）24小時后，用Annexin V/PI雙染色法檢測不同膽固醇濃度培養(yǎng)

2、基中滋養(yǎng)細(xì)胞壞死凋亡程度。同時用ELISA法檢測不同濃度膽固醇培養(yǎng)滋養(yǎng)細(xì)胞24小時后上清液中尿酸的濃度。(2)用上述不同濃度膽固醇培養(yǎng)基培養(yǎng)滋養(yǎng)細(xì)胞后用冷凍法制備滋養(yǎng)細(xì)胞微粒，BCA法標(biāo)定微粒蛋白濃度，采用酶聯(lián)免疫分析法（ELISA法）檢測各組微粒中堿性磷酸酶（PLAP）含量，推測膽固醇水平對滋養(yǎng)細(xì)胞微粒產(chǎn)生的影響。(3)用不同濃度膽固醇培養(yǎng)的滋養(yǎng)細(xì)胞微粒與臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞共培養(yǎng)，采用流式細(xì)胞儀Annexin V/PI雙染色法觀察臍靜脈內(nèi)

3、皮細(xì)胞凋亡情況。并取上述細(xì)胞培養(yǎng)上清液，檢測不同脂質(zhì)水平的STBM作用于臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞后對內(nèi)皮素（ET-1）產(chǎn)生的影響，推測脂質(zhì)水平對子癇前期血管內(nèi)皮功能紊亂的作用程度。
　　結(jié)果：
　?。?）通過檢測分析發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基中膽固醇濃度（0，25，50，100mg/L）越高，滋養(yǎng)細(xì)胞的凋亡率越高，尤其是早期凋亡率的增高更明顯。細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的尿酸水平也越高，而且呈現(xiàn)出劑量依賴性。(2)培養(yǎng)液中膽固醇濃度越高（0，25，50，100

4、mg/L），滋養(yǎng)細(xì)胞微粒中堿性磷酸酶的濃度越高。（3）培養(yǎng)基中膽固醇濃度越高，滋養(yǎng)細(xì)胞微粒導(dǎo)致臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的能力越強，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，微粒誘導(dǎo)臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)皮素的能力也越強，上清液中的內(nèi)皮素濃度隨膽固醇濃度增高而增高。
　　結(jié)論：
　　培養(yǎng)基中膽固醇濃度越高，則引起滋養(yǎng)細(xì)胞壞死凋亡的能力越強，導(dǎo)致滋養(yǎng)細(xì)胞產(chǎn)生微粒的數(shù)量增加，引起臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞壞死凋亡的能力越強。同時高膽固醇濃度也會引起滋養(yǎng)細(xì)胞產(chǎn)生尿酸的水平增加