bFGF對(duì)鞘內(nèi)肌腱內(nèi)源性愈合影響的組織學(xué)觀察.pdf

1、目的：肌腱損傷在骨科臨床工作中極其常見(jiàn)，特別是屈指肌腱，其術(shù)后愈合與粘連問(wèn)題的解決一直是個(gè)難題。雖然盡力恢復(fù)其連續(xù)性，保持修復(fù)、吻合處平整、光滑，但絕大多數(shù)患者都須經(jīng)過(guò)長(zhǎng)時(shí)間的固定及二期肌腱松解來(lái)進(jìn)一步恢復(fù)其功能，且功能恢復(fù)的程度仍不理想。多年來(lái)，人們對(duì)肌腱解剖、生理、病理及愈合過(guò)程進(jìn)行了大量的臨床及實(shí)驗(yàn)研究，探索了許多促進(jìn)肌腱愈合和預(yù)防粘連的方法，取得了一定的成果，但是始終沒(méi)有一種效果確切而且操作簡(jiǎn)單、成本低廉的方法能夠在臨床普遍推廣

2、。 堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)，是肝素結(jié)合型生長(zhǎng)因子家族中的成員之一，是由146個(gè)氨基酸組成的多肽。已有研究證實(shí)，外源性bFGF既能促進(jìn)肌腱愈合也加劇粘連程度，關(guān)鍵在于選擇什么樣的途徑或方法能夠揚(yáng)長(zhǎng)避短。這成為目前國(guó)內(nèi)外研究的重點(diǎn)。本試驗(yàn)通過(guò)將靜脈留置針置于肌腱斷端間，早期持續(xù)注入適量bFGF，干預(yù)肌腱的愈合過(guò)程。從組織學(xué)角度觀察其對(duì)肌腱內(nèi)源性愈合的影響，以及比較愈合與粘連的進(jìn)程。旨在為肌腱損傷后加速肌腱愈合的進(jìn)程，使之

3、適于早期功能鍛煉提供理論依據(jù)。 方法：健康雄性萊亨雞78只，隨機(jī)分成3組。氯胺酮肌肉注射麻醉成功后，穩(wěn)妥固定于操作臺(tái)上，右膝關(guān)節(jié)以遠(yuǎn)常規(guī)清洗、消毒、鋪巾。于第3趾近節(jié)與中節(jié)“∏”形切開(kāi)皮膚分離皮下組織，打開(kāi)A2-A4滑車之間的鞘管。制備趾深屈肌腱橫斷模型。A組近側(cè)端肌腱內(nèi)縱行放置靜脈留置針，開(kāi)口于斷端，以備斷端間給藥。B組鞘管內(nèi)放置靜脈留置針，以備鞘管內(nèi)給藥。C組原位縫合肌腱、自然愈合。三組均采用6-0無(wú)創(chuàng)傷縫合線行改良：Kes

4、sler縫合，間斷縫合修復(fù)鞘管。術(shù)后各組均用石膏固定雞爪成拳擊手套狀，各組動(dòng)物回籠飼養(yǎng)，自由活動(dòng)?？股貞?yīng)用3天，預(yù)防感染。自術(shù)后24小時(shí)起經(jīng)留置針應(yīng)用5.0ng/ml的bFGF，A組2μl/次、B組5μl/次。每12小時(shí)一次，連續(xù)8次，拔除留置針。于術(shù)后2、3、4、6周各組分別取6只雞，局麻下逐層解剖。行大體觀察，HE、Masson組織染色觀察，圖像分析，術(shù)后4周各組加取兩趾行掃描和透射電鏡觀察，對(duì)各組數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)

5、果：大體觀察：術(shù)后2周，各組半透明膠凍樣物存在于斷端間及周圍，B組肌腱斷端周圍廣泛粘連，微紅色、較疏松的組織填充于腱鞘與肌腱之間，質(zhì)脆；A、C兩組粘連程度相似較B組輕，B組斷端膠胨樣物質(zhì)與A組相似，顏色較C組暗，堅(jiān)韌度也強(qiáng)于C組。術(shù)后3周，吻合處梭形膨大的顏色有所加深，彈性增強(qiáng)，質(zhì)較韌，粘連明顯加重，B組粘連范圍較大，鈍性分離較難，斷端連接牢固，肌腱滑動(dòng)受限：A、C組僅梭形膨大處粘連，鈍性分離較B組容易；各組斷端膠胨樣物質(zhì)顏色更渾濁，堅(jiān)

6、韌度增強(qiáng)，C組相對(duì)較差。術(shù)后4周，B組肌腱致密粘連，粘連帶與3周時(shí)相似，須銳性分離。腱斷端被較牢固的纖維組織連接，暗灰色，質(zhì)韌，彈性好；A、C組肌腱粘連范圍相似，愈合情況A組明顯好于C組。術(shù)后6周，肌腱粘連程度A、C兩組相似，較B組肌腱粘連程度輕。A、B組愈合質(zhì)量相似，較C組好。 組織學(xué)觀察：A、B兩組斷端愈合情況表現(xiàn)相似。A、C兩組腱周圍粘連情況接近。術(shù)后2周，A組肌腱實(shí)質(zhì)內(nèi)成纖維細(xì)胞增生非?；钴S，可見(jiàn)大量新生膠原纖維和增生的

7、毛細(xì)血管，明顯多于腱周。B組腱實(shí)質(zhì)內(nèi)成纖維細(xì)胞及膠原纖維排列含量較A組稍差，腱周大量肉芽組織增生。C組成纖維細(xì)胞數(shù)量和新生膠原纖維量較少，排列紊亂，可見(jiàn)少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。術(shù)后3周，A組肌腱斷端由大量新生的形態(tài)和排列較規(guī)則的成纖維細(xì)胞和膠原纖維所連接。腱周和腱實(shí)質(zhì)內(nèi)細(xì)胞數(shù)量增加。毛細(xì)血管數(shù)量較前有所減少。B組腱實(shí)質(zhì)與腱周的成纖維細(xì)胞及膠原纖維含量豐富，新生的膠原纖維和成纖維細(xì)胞連接斷端，膠原纖維排列較A組稍紊亂。C組大量成纖維細(xì)胞增生較活

8、躍，新生膠原纖維粗大、不均勻、排列較紊亂，縱橫交錯(cuò)較嚴(yán)重。毛細(xì)血管明顯增生。術(shù)后4周，A、B組肌腱斷端愈合情況均較好，成纖維細(xì)胞增生旺盛，向腱細(xì)胞分化。膠原纖維均勻，排列規(guī)則。C組較差。B組粘連最重。術(shù)后6周A組愈合情況最好，可見(jiàn)斷端的膠原纖維基本融入腱實(shí)質(zhì)，界限不明顯。毛細(xì)血管少見(jiàn)；B組腱內(nèi)情況與A組接近，但肌腱與周圍組織的粘連嚴(yán)重；C組實(shí)質(zhì)內(nèi)成纖維細(xì)胞較多，腱細(xì)胞明顯較A、B組少，且分化稍不成熟。斷端膠原纖維豐富、不均勻、呈波浪狀、

9、排列趨于規(guī)則，自斷端向腱實(shí)質(zhì)過(guò)度明顯。 圖像分析結(jié)果：術(shù)后各周腱實(shí)質(zhì)內(nèi)成纖維細(xì)胞數(shù)量和膠原纖維含量A組與B組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P>0.05 A、B組與C組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，量都大于C組，P<0.05；腱周A組與C組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P>0.05；A、C組與B組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P<0.05。 結(jié)論：損傷肌腱內(nèi)縱行留置纖細(xì)的留置針，于肌腱斷端處早期滴注5.0ng/ml的外源性bFGF，可以有效的促進(jìn)肌腱內(nèi)源性愈合