運動對糖尿病大鼠心肌肌漿網(wǎng)鈣調(diào)控蛋白的干預(yù)研究.pdf

1、目的: 本實驗旨在通過建立1型糖尿病大鼠模型并對其進行運動干預(yù)，觀察糖尿病大鼠心肌肌漿網(wǎng)(SR)鈣離子調(diào)控蛋白Ca2+-ATP酶(SERCA2)、磷酸受納蛋白(PLB)和Ryanodine受體(RYR)的mRNA和蛋白表達(dá)變化，探討運動干預(yù)對糖尿病大鼠心肌中肌漿網(wǎng)鈣離子調(diào)控蛋白變化的影響及其機制，為進一步研究運動對糖尿病進行有效治療提供實驗依據(jù)。 方法：實驗大鼠隨機分為四組：正常對照組(Control，C組)、運動對照組(Exe

2、rcise，E組)、糖尿病組(Diabetes，D組)和糖尿病+運動組(D+E組)。建模前大鼠先禁食一天，腹腔注射55mg/kg的鏈尿佐菌素(STZ)，C組及D組大鼠腹腔注射等體積檸檬酸緩沖溶液。常規(guī)飼養(yǎng)觀察，監(jiān)測血糖持續(xù)在16.7mmol/L以上者為糖尿病鼠，棄去其間死亡的糖尿病大鼠。糖尿病大鼠模型復(fù)制成功后第四天開始跑臺運動，運動方案為每周5次，跑臺坡度為10，前兩周跑臺速度20m/min，每次30min，后兩周為10m/min，每

3、次20min，其它同糖尿病組。于飼養(yǎng)第4周末殺鼠并采用心臟采血4-6毫升，離心收集血清，用放射免疫法測定血清胰島素水平，氧化酶法測定血糖，常規(guī)法測定血脂和糖化血清蛋白水平；取部分心肌組織行固定液保存做HE染色，取心臟組織心尖部分采用RT—PCR檢測肌漿網(wǎng)鈣離子調(diào)控蛋白SERCA2、PLB和RYR2的mRNA表達(dá)；Western-blotting檢測各蛋白的表達(dá)情況。 結(jié)果： 1、與正常對照組(C組)相比，糖尿病組(D組)

4、和糖尿病+運動組(D+E組)血糖水平持續(xù)大于16.7mmol/L，提示經(jīng)腹腔一次大劑量注射STZ后糖尿病大鼠模型建立成功。 2、與正常對照組(C組)相比，糖尿病組(D組)血糖、糖化血清蛋及低密度脂蛋白水平升高，胰島素和高密度脂蛋白降低；糖尿病+運動組(D+E組)血糖及糖化血清蛋白水平升高，血脂趨于正常；與糖尿病組相比，糖尿病+運動組血糖及糖化血清蛋白水平降低(P＜0.05)，提示運動能夠?qū)μ悄虿〈笫笪蓙y的脂質(zhì)代謝起到改善調(diào)節(jié)作用

5、。 3、與正常對照組(C組)相比，糖尿病組大鼠心肌病理改變可見肌纖維退行性改變，肌束間隙增寬，血管壁增厚，基底膜不完整，側(cè)面證實糖尿病模型建立成功，糖尿病+運動組(D+E組)心肌肌束較密集，血管壁增厚不明顯，基底膜不完整，提示4周運動干預(yù)對糖尿病心肌病理改變有一定的保護作用。 4、與正常對照組(C組)相比，糖尿病組大鼠心肌細(xì)胞SERCA2、PLB和RYR2的基因表達(dá)和SERCA2及PLB蛋白表達(dá)無顯著差異性，而正常運動組

6、及糖尿病+運動組SERCA2、PLB和RYR2的基因表達(dá)上調(diào)(P＜0.01)，SERCA2和PLB的蛋白表達(dá)量增加，提示運動對糖尿病心肌的保護機制可能與上調(diào)鈣離子調(diào)控蛋白SERCA2、PLB和RYR2的基因表達(dá)有關(guān)。 結(jié)論： 1、通過腹腔一次大劑量注射STZ(55mg/kg)成功建立1型糖尿病并伴有心肌損傷、脂代謝紊亂等并發(fā)癥的動物模型。 2、運動對糖尿病大鼠的心肌損傷有保護作用，其作用機制可能與運動上調(diào)鈣調(diào)控蛋