糖尿病心肌組織肌漿網(wǎng)鈣轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶小泛素樣修飾的研究.pdf

1、博士學(xué)位論文學(xué)校代碼：10023糖尿病心肌組織肌漿網(wǎng)鈣轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶小泛素樣修飾的研究所院：姓名：指導(dǎo)教師：導(dǎo)師小組：學(xué)科專業(yè)：研究方向：完成日期：阜外心血管病醫(yī)院姚晶吳永健教授尤世杰教授俞夢越教授滕思勇教授內(nèi)科學(xué)心血管病二零一四年五月北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院博士學(xué)位論文第一部分：糖尿病心肌病新機(jī)制研究一一糖尿病減弱心肌組織肌漿網(wǎng)鈣轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶的小泛素樣修飾程度摘要背景：肌漿網(wǎng)鈣轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶(SERCA2a)是心肌舒張期鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)出細(xì)

2、胞質(zhì)最重要的離子泵，SERCA2a活性與表達(dá)下降是糖尿病導(dǎo)致心肌舒張功能不全以及心肌損傷的重要機(jī)制。新近研究報道了小泛素樣修飾可以提高SERCA2a的ATP酶活性、蛋白表達(dá)及穩(wěn)定性。既往研究討論了糖尿病損傷心肌組織內(nèi)SERCA2a表達(dá)及活性的眾多機(jī)制，然而，糖尿病是否可以作用于SERCA2a的小泛素樣修飾進(jìn)而影響SERCA2a的活性與表達(dá)尚未明確。研究方法：使用小動物超聲和左室壓力測定評價糖尿病大鼠和對照組大鼠心肌收縮和舒張功能；使用W

3、estern—blot和RTPCR等手段比較糖尿病組和對照組大鼠心肌組織內(nèi)SERCA2a的表達(dá)情況，使用免疫共沉淀以及小泛素樣修飾試劑盒分析糖尿病大鼠和對照組大鼠心肌組織內(nèi)SERCA2a小泛素樣修飾程度；同時比較在不同葡萄糖和胰島素濃度下心肌細(xì)胞內(nèi)SERCA2a小泛素樣修飾程度以及SERCA2a和其他小泛素樣修飾相關(guān)蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果：相比于對照組大鼠，2型糖尿病大鼠心肌收縮、舒張功能均下降，尤以舒張功能下降更為明顯。糖尿病大鼠心肌組

4、織內(nèi)SERCA2a蛋白水平、基因表達(dá)and泛素樣修飾程度均下降；小泛素樣修飾酶E2(Ubc9)的蛋白水平在糖尿病大鼠心肌中也下降，而SUM01and泛素樣修飾酶E1(SAEl和SAE2組成的二聚體)與對照組大鼠相比沒有顯著差異。高葡萄糖單獨作用下，心肌細(xì)胞內(nèi)SERCA2a的小泛素樣修飾程度升高并隨著葡萄糖濃度的提高而提高，然而在加入100mlU／L的胰島素之后，心肌細(xì)胞內(nèi)SERCA2a的小泛素樣修飾程度隨著葡萄糖濃度的提高而降低。Ubc