短鏈脂肪酸鹽丁酸鈉抑制人結(jié)腸癌細(xì)胞SW620增殖及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：研究短鏈脂肪酸鹽丁酸鈉對(duì)體外培養(yǎng)的人結(jié)腸癌細(xì)胞SW620增殖抑制的影響，并探討其作用機(jī)制。
　　 方法：人結(jié)腸癌細(xì)胞株SW620用含10％胎牛血清的RPMT1640培養(yǎng)基置37℃、5％CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)分為對(duì)照組和不同濃度丁酸鈉（1.0mmol/L、2.0mmol/L、4.0mmol/L、10.0mmol/L）處理組，加藥物后培養(yǎng)24，48，72小時(shí)。MTT比色法測(cè)定丁酸鈉對(duì)SW620細(xì)胞生長(zhǎng)和抑制率的變化，倒置相差顯

2、微鏡觀察其形態(tài)變化，流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期分布的變化，并采用RT-PCR檢測(cè)p21WAF1mRNA和VEGFmRNA的表達(dá)變化，Western Blot檢測(cè)p21WAF1、VEGF蛋白水平的表達(dá)變化。
　　 結(jié)果：1、經(jīng)丁酸鈉處理后，與對(duì)照組比較可觀察到SW620細(xì)胞形態(tài)發(fā)生明顯改變。2、MTT檢測(cè)法顯示，與對(duì)照組比較，經(jīng)不同濃度（1.0mmol/L、2.0mmol/L、4.0mmol/L、10.0mmol/L）丁酸鈉處理后SW

3、620細(xì)胞增殖受到抑制，并呈一定的濃度和時(shí)間依賴性。3、流式細(xì)胞儀檢測(cè)顯示，經(jīng)2.0mmol/L、4.0mmol/L、10.0mmol/L的丁酸鈉處理48小時(shí)后，SW620細(xì)胞S期比例明顯減少，分別從處理前的28.99％降至14.39％、6.54％、5.04％（p<0.05）；而G0/G1期比例則逐漸增加，分別從處理前的51.11％增至65.71％、78.98％、90.40％（p<0.05）。4、經(jīng)不同濃度的丁酸鈉處理24小時(shí)后，p21

4、WAF1在mRNA水平和蛋白水平的表達(dá)均明顯上調(diào)，VEGF在mRNA水平和蛋白水平的表達(dá)出現(xiàn)下調(diào)，與對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）；且隨丁酸鈉作用濃度增加，p21WAF1上調(diào)水平有逐漸增加趨勢(shì)，相反，VEGF表達(dá)水平呈逐漸下調(diào)趨勢(shì)。
　　 結(jié)論：丁酸鈉能有效抑制人結(jié)腸癌細(xì)胞SW620的增殖，且呈一定的濃度、時(shí)間依賴性，其機(jī)制與上調(diào)p21WAF1在mRNA水平和蛋白水平的表達(dá)，使細(xì)胞周期阻滯在G0/G1期有關(guān)。丁酸鈉亦能下