過氧化物酶增殖物激活受體γ抑制鼠肝臟部分缺血再灌注中TLR4表達及其機制.pdf

1、第一部分：羅格列酮抑制鼠肝臟缺血再灌注中TLR4基因表達的時序性變化及意義目的：通過研究過氧化物酶增殖物激活受體γ（peroxisome proliferater-activated receptorγ，PPARγ）激動劑羅格列酮抑制TLR4基因在小鼠肝臟缺血再灌注損傷（ischemia/reperfusion injury，IRI）中的動態(tài)時序性表達,探討羅格列酮對TLR4基因表達的抑制與肝功能損傷間的關系。 方法：以BALB

2、/c小鼠復制肝臟部分IRI模型，動物隨機分為羅格列酮+IRI組、對照組(二甲基亞砜+IRI組)及假手術組。在缺血再灌注的0、2、4及6小時采集標本。采用實時熒光定量PCR方法觀測在小鼠肝臟部分缺血再灌注損傷模型中羅格列酮抑制TLR4基因的動態(tài)時序性表達變化,同時動態(tài)監(jiān)測門靜脈血清腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）及丙氨酸氨基轉移酶（alanine aminotransferase,ALT）水平

3、。 結果：鼠肝臟左中葉缺血1 h 后,不同的再灌注時間0h,2h,4h,6h中羅格列酮+IRI組缺血肝葉TLR4基因表達、血清TNF-α及ALT水平較二甲基亞砜+IRI組中均明顯下調(P<0.05)。再灌注4小時二甲基亞砜+IRI組缺血肝葉的TLR4基因表達最高，與同組中不同的再灌注時間0h,2h，6h差異顯著(P<0.05)。再灌注4小時羅格列酮+IRI組缺血肝葉TLR4基因表達最低,與同組中不同的再灌注時間0h,2h，6h差

4、異顯著(P<0.05)。 結論：小鼠肝臟部分缺血再灌注模型中羅格列酮抑制TLR4基因表達并減輕肝臟損傷。羅格列酮影響最為顯著的時間點是復灌后4小時。 第二部分：PPARγ抑制鼠肝臟部分缺血再灌注中TLR4表達及其機制 目的:為深入探討肝臟缺血再灌注損傷機制，尋找肝缺血再灌注損傷治療的新靶點,我們觀察在小鼠肝臟部分IRI中PPARγ及TLR4表達及門靜脈血清TNF-α、白細胞介素10（interleukin-10，

5、IL-10）和ALT水平的變化,研究在此過程中羅格列酮激活的PPARγ對TLR4表達改變及與IL-10相互作用機制及其生物學效應。 方法：以BALB/c小鼠制作肝臟部分IRI模型。小鼠隨機分為五組: 羅格列酮+IRI組、羅格列酮＋BADGE+IRI組、BADGE+IRI組、對照組(二甲基亞砜+IRI組)、假手術組。復灌4小時處死動物取材。采用實時熒光定量PCR方法觀測PPARγ、TLR4基因在各組小鼠肝臟部分缺血再灌注損傷過程中

6、的表達變化,同時檢測血漿TNF-α、IL-10及ALT水平，行肝臟的病理切片（HE染色）檢查。 結果：結果顯示羅格列酮+IRI組PPARγ表達較羅格列酮＋BADGE+IRI組、BADGE+IRI組及對照組顯著增高(P<0.05)。羅格列酮+IRI組的TLR4表達較羅格列酮＋BADGE+IRI組、BADGE+IRI組及對照組顯著減弱(P<0.05)。羅格列酮+IRI組血清IL-10水平較羅格列酮＋BADGE+IRI組、BADGE+

7、IRI組及對照組顯著增高(P<0.05)。羅格列酮+IRI組血清TNF –α及ALT水平較羅格列酮＋BADGE+IRI組、BADGE+IRI組及對照組顯著降低(P<0.05),均高于假手術組(P<0.05)。病理切片顯示羅格列酮+IRI組中肝細胞輕中度水腫，羅格列酮＋BADGE+IRI組、BADGE+IRI組及對照組中肝細胞重度水腫，小葉結構破壞明顯。 結論：鼠肝臟IRI中羅格列酮激活PPAR-γ并上調IL-10水平,抑制TLR