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文檔簡介
1、目的:利用已構建成功的、在人胰腺癌細胞系CFPAC-1中穩(wěn)定抑制CDC2583的重組慢病毒,建立CDC2583表達降低的細胞系,以研究該基因的作用。 方法:將產(chǎn)生CDC2583 siRNA分子的攜帶綠色熒光蛋白(GFP)的重組慢病毒感染細胞后,用流式細胞儀篩選穩(wěn)定表達GFP的細胞;應用RT-PCR和Western blot對細胞中CDC2583的mRNA和蛋白表達水平進行分析;用MTT法、流式細胞儀、平板克隆形成和Transwe
2、ll小室法分別檢測其對細胞增殖、周期、細胞克隆形成能力和遷移侵襲能力的影響。 結果:CDC2583 siRNA顯著下調了CFPAC-1細胞中CDC2583的表達,所構建的重組慢病毒導入的siRNA有較高的沉默效率,CFPAC-1細胞的增殖能力、克隆形成能力以及遷移侵襲能力顯著增強,細胞周期無明顯改變。 結論:CDC2583基因可顯著地影響胰腺癌CFPAC-1細胞的增殖、克隆形成和遷移侵襲能力,本研究為利用CDC2583所
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