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文檔簡介
1、目的研究Foxp3基因在大鼠1型糖尿病模型中的表達及雷公藤對其表達的影響,以期探討Foxp3基因表達的變化在1型糖尿病發(fā)病機制中的意義。 方法:將Wistar大鼠隨機分成三組:Ⅰ組為正常對照,Ⅱ組為糖尿病組、Ⅲ組為雷公藤組,Ⅱ組、Ⅲ組采用完全福氏佐劑聯(lián)合小劑量鏈脲佐菌素(STZ)腹腔注射的方法制備大鼠1型糖尿病模型,成模后Ⅲ給予雷公藤多甙(GTT)灌胃,1次/d,連續(xù)3個月,其中每隔1個月每組各處死一批。處死大鼠后分離血清用間接
2、ELISA法測定自身抗體的水平;取胰腺做HE染色觀察其病理變化;淋巴細胞轉(zhuǎn)化試驗(MTT法)檢測脾單個核細胞增殖活性;提取外周血及脾單個核細胞總RNA,實時熒光定量聚合酶鏈反應(Real-time PCR)檢測Foxp3 mRNA的表達;應用免疫組織化學技術(shù)檢測淋巴結(jié)和脾組織中Foxp3蛋白的表達,并與對照組進行比較。 結(jié)果:小劑量多次腹腔注射STZ成功制造了大鼠1型糖尿病模型,成模率87.88%。成模后Ⅱ、Ⅲ組血糖均較I組明顯
3、升高(P<0.01),此后3個月一直維持在高水平;胰島相關(guān)自身抗體檢測結(jié)果顯示Ⅱ、Ⅲ組大鼠血清平均自身抗體的水平明顯高于Ⅰ組(P<0.05);胰腺HE染色示Ⅱ、Ⅲ組大鼠胰腺間質(zhì)及胰島中可見以淋巴細胞和單核細胞為主的炎性細胞浸潤,Ⅲ組在給藥2個月后炎性細胞浸潤程度較Ⅱ組減輕,3個月后減輕更加明顯;Ⅱ、Ⅲ組單個核細胞增殖活性均較Ⅰ組明顯升高(P<0.01),用藥后3個月中Ⅲ組呈下降趨勢,Ⅱ組持續(xù)在高水平;Ⅱ、Ⅲ組在成模后1、2、3個月中外周
4、血及脾單個核細胞Foxp3 mRNA水平均較Ⅰ組升高(P<0.05),其中,Ⅲ組表達水平較Ⅱ組進一步升高(2、3月后升高明顯),但差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。3個月中隨著時間的推移,Ⅰ組組間無明顯變化,Ⅲ組間外周血和脾單個核細胞Foxp3 mRNA表達水平呈升高趨勢,而Ⅱ組組問呈降低趨勢;Foxp3蛋白表達水平Ⅱ、Ⅲ組均普遍高于Ⅰ組(P<0.05),Ⅲ組表達水平較Ⅱ組有所升高,但差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 結(jié)論:F
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