乳牛肝菌和松乳菇菌絲體生長特性及菌根合成的研究.pdf

1、本論文以乳牛肝菌（Suillus biovinus）和松乳菇（Lactarius deliciosus）為研究對象，以1/2MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，采用單因素試驗，對兩種菌根性食用菌的固體培養(yǎng)和液態(tài)發(fā)酵條件進行優(yōu)化，篩選出影響乳牛肝菌和松乳菇菌絲生長的各因素的最佳值。并進一步在無菌條件下對乳牛肝菌和松乳菇進行菌根合成試驗，探討基質(zhì)種類、接種方法、菌種種齡等因素對菌根侵染率的影響，為實現(xiàn)大規(guī)模組培化菌根苗的生產(chǎn)提供理論基礎(chǔ)與依據(jù)。主要實驗

2、結(jié)果如下：
　　1、固體培養(yǎng)基優(yōu)化
　　單因素試驗結(jié)果顯示，適宜乳牛肝菌生長的最適碳源為20g/L葡萄糖、離子濃度為1/4MS、活性炭濃度為0.5g/L、適宜添加的植物生長調(diào)節(jié)劑為0.4～0.6mg/L NAA，菌絲最高日生長量可達2.45mm/d。乳牛肝菌在以1/2MS液體培養(yǎng)基浸泡的不同基質(zhì)上菌絲生長存在顯著性差異，其中以純棉籽殼或蛭石、棉籽殼混合基質(zhì)（1:1）效果最佳。
　　松乳菇菌絲生長的最適碳源為20g/L葡

3、萄糖，最適離子濃度是2MS，最適的植物生長調(diào)節(jié)劑為1.0～2.0mg/L6-BA或0.4mg/LNAA，最適的活性炭濃度為1.0～1.5g/L。
　　2、液體發(fā)酵條件優(yōu)化
　　乳牛肝菌生長曲線（基本液體培養(yǎng)基：1/2MS+20g/L葡萄糖+100mg/L肌醇+100mg/L酪蛋白，pH6.0）可分為四個時期：延滯期（3～5d），快速生長期（5～12 d），穩(wěn)定期（12～14d），衰亡期（14d~）。適宜的發(fā)酵條件為：最適接種

4、量為6％～8%，種子液種齡為5～7d，初始pH值為6.0，裝液量為100mL/250mL，搖床轉(zhuǎn)速為140r/min，適宜的封口材料為封口膜，最適發(fā)酵溫度范圍為24～26℃。在優(yōu)化條件下乳牛肝菌的菌絲體干重生物量可達3.26g/L，是初始干重的20倍左右，比優(yōu)化前提高了33.1%。
　　松乳菇的液態(tài)發(fā)酵生長曲線（基本液體培養(yǎng)基：2MS+20g/L葡萄糖+100mg/L肌醇+100mg/L酪蛋白，pH6.0）分為四個時期：延滯期（1

5、～14d），快速生長期（14～30d），穩(wěn)定期（30～34d），衰亡期（34d～）。通過對發(fā)酵條件進行優(yōu)化可以確定各因素的最適因子為：15g/L葡萄糖，2MS離子濃度，8%初始接種量，種子液種齡為20d，裝液量80mL/250mL，搖床轉(zhuǎn)速180r/min，6層紗布封口，最適pH6.0，發(fā)酵溫度在30～32℃之間。在優(yōu)化條件下松乳菇的菌絲體干重生物量可達2.24g/L，是初始干重的25倍左右，比優(yōu)化前提高了54.5%。
　　3、無

6、菌條件下菌根合成
　　乳牛肝菌與黑赤松可以形成菌根，適宜的菌根合成基質(zhì)為蛭石和棉籽殼混合基質(zhì)（2:1），菌根侵染率可達64.9%；在1/2MS+1.0mg/L NAA+20g/L葡萄糖+2g/L活性炭+100mg/L肌醇+100mg/L酪蛋白+5.7g/L瓊脂培養(yǎng)基上菌根合成可達79.9%的侵染率；接種10～15d的乳牛肝菌菌塊或添加液態(tài)發(fā)酵種齡6d的乳牛肝菌菌絲球以及在菌懸液中浸泡黑赤松無菌種苗根系10h三種接種方法均可以達到最