PP2A在ATRA、ATO誘導(dǎo)APL細(xì)胞分化與凋亡過程中作用的實(shí)驗(yàn)研究及ATRA、ATO治療APL的臨床觀察.pdf

1、南京中醫(yī)藥大學(xué)博士學(xué)位論文PP2A在ATRA、ATO誘導(dǎo)APL細(xì)胞分化與凋亡過程中作用的實(shí)驗(yàn)研究及ATRA、ATO治療APL的臨床觀察姓名：徐喜慧申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：中西醫(yī)結(jié)合指導(dǎo)教師：歐陽建20080501PF2A在ATRA、ATe誘導(dǎo)APL細(xì)胞分化與凋亡過程中作用的實(shí)驗(yàn)研究及ATRA、ATe治療APL的臨床觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)，細(xì)胞遺傳學(xué)和分子水平都有其特點(diǎn)95％的APL具有特異的染色體易位t(15；17)(q22；q21)，形成特有

2、的PML／RARo【融合基因ATRA和AT0是目前治療APL最有效的藥物NB4細(xì)胞株是來源于急性早幼粒細(xì)胞白血病(acutepromyelocyticleukemia，APL)的細(xì)胞株，它對(duì)ATRA治療敏感，而MR2細(xì)胞是來源于對(duì)ATRA耐藥的NB4細(xì)胞株研究顯示，PP2A的抑制劑OKA可加強(qiáng)ATRA誘導(dǎo)的早幼粒細(xì)胞白血病HL60細(xì)胞株分化，因此PP2A可能也參予了ATRA誘導(dǎo)的NB4細(xì)胞分化MR2細(xì)胞對(duì)ATRA是耐藥的，PP2A是否參

3、予其信號(hào)傳導(dǎo)需進(jìn)一步研究三氧化二砷(arsenictrioxide，ATO)是天然存在的一種劇毒物質(zhì)，為中藥砒霜的主要成分對(duì)于APL細(xì)胞，它具有劑量依賴的雙重活性，低濃度時(shí)誘導(dǎo)APL細(xì)胞分化，高濃度時(shí)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)及臨床均表明APL細(xì)胞對(duì)ATO敏感，包括ATRA耐藥的APL細(xì)胞，因此其作用機(jī)制與ATRA不同因此是否PP2A在兩種藥物作用中的參與機(jī)制具有不同點(diǎn)呢本研究中，我們以NB4和MR2細(xì)胞為研究對(duì)象，觀察在ATRA、AT0誘導(dǎo)其分

4、化和／或凋亡過程中，及在PP2A抑制劑存在的情況下，兩細(xì)胞株P(guān)P2A活性及其亞基表述的變化，并探討PP2A與MR2細(xì)胞對(duì)ATRA耐藥的關(guān)系本研究主要內(nèi)容包括三個(gè)方面：①研究ATRA誘導(dǎo)NB4細(xì)胞、MR2細(xì)胞分化過程中PP2A活性與表達(dá)的變化，探討PP2A活性與MR2細(xì)胞株發(fā)生耐藥的關(guān)系；②研究AT0誘導(dǎo)的NB4、MR2細(xì)胞凋亡過程中PP2A活性與表達(dá)的變化；③觀察ATRA聯(lián)合ATO雙誘導(dǎo)緩解方案與單用ATRA誘導(dǎo)緩解方案治療APL療效及

5、副作用的差異，并探討緩解后采用聯(lián)合ATRA，AT0和化療的序貫療法對(duì)患者長期生存的影響第一部分：PP2A在ATRA誘導(dǎo)NB4、MR2細(xì)胞株分化過程中的變化及與耐藥的關(guān)系【摘要1目的：研究ATRA誘導(dǎo)NB4細(xì)胞、MR2細(xì)胞分化過程中PP2A活性與表達(dá)的變化，探討PP2A活性與MR2細(xì)胞株發(fā)生耐藥的關(guān)系方法：選用ATRA、岡田酸(Okadaicacid，OKA)、ATRAOKA分別作用于NB4和MR2細(xì)胞，采／司MTT法測(cè)定細(xì)胞增殖率，瑞特