原發(fā)性膽汁性肝硬化患者外周血單個核細(xì)胞基因表達(dá)譜的相關(guān)研究.pdf

1、第一部分全基因組表達(dá)譜芯片檢測
　　 目的:利用基因芯片技術(shù)找出原發(fā)性膽汁性肝硬化（primary biliary cirrhosis，PBC）患者中差異表達(dá)的基因。方法:收集PBC患者和健康對照各3例，采集外周靜脈血，提取PBMC總RNA，進(jìn)行人類全基因組表達(dá)譜芯片（22K，約22000個基因）檢測。結(jié)果:基因芯片共篩選出356個在PBC中差異表達(dá)的基因，其中296個表達(dá)上調(diào)，60個表達(dá)下調(diào)。結(jié)論:基因芯片為探索PBC的發(fā)病機(jī)

2、制提供了方向。
　　 第二部分實時熒光定量PCR及ELISA檢測
　　 目的:擴(kuò)大樣本量驗證芯片結(jié)果的準(zhǔn)確性，進(jìn)一步分析篩選基因mRNA及蛋白水平與疾病相關(guān)性。方法:選取5個基因CCL20、CCL3、PBEF1、S100A12、CD14，擴(kuò)大樣本量對PBC患者、健康對照、慢性乙肝患者進(jìn)行RT-PCR及ELISA驗證。結(jié)果:PBC患者PBMC中CCL20、CCL3、PBEF1、S100A12、CD14 mRNA表達(dá)均升高，