不同劑量X射線對(duì)SD大鼠成熟精子功能影響的研究.pdf

1、目的：
　　 研究不同劑量X射線照射后不同時(shí)間點(diǎn)SD大鼠成熟精子透明質(zhì)酸酶(hyaluronidase HYD)活性及富含胱氨酸分泌蛋白(CRISP2)基因mRNA表達(dá)水平的影響，比較其與照射后精子活力的關(guān)系，探討電離輻射對(duì)精子活力影響的機(jī)制，為系統(tǒng)研究電離輻射對(duì)男性生殖功能的影響提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法：
　　 以輻射劑量0、1、2、4、6Gy隨機(jī)分為5大組，每大組按1、4、8、12、24h時(shí)間點(diǎn)分為5小組。

2、以Precise分直線加速器產(chǎn)生的X線局部照射活體SD大鼠外生殖系統(tǒng)（劑量率為442.89cGy/min），用改良明膠底物膜法檢測(cè)大鼠成熟精子透明質(zhì)酸酶活性，常規(guī)顯微鏡檢測(cè)大鼠成熟精子活力，采用PCR技術(shù)檢測(cè)大鼠成熟精子CRISP2基因mRNA表達(dá)水平。
　　 結(jié)果：
　　 1.精子HYD在X線照射后的活性變化。
　　 對(duì)照組各時(shí)間點(diǎn)頂體內(nèi)透明質(zhì)酸酶陽(yáng)性反應(yīng)率為(70.2±1.92)％、(67.6±5.81)％、

3、(69.8±2.16)％、(68±6.67)％、(71.2±2.86)％。4Gy、6Gyx射線照射不同時(shí)間(1、4、8、12、24h)后大鼠精子的HYD陽(yáng)性反應(yīng)率均較對(duì)照組顯著下降(6.28＜t＜25.8，P＜0.05)，其中6Gy照射后24h HYD反應(yīng)率最低(t=25.8，P＜0.01);2Gy x射線照射不同時(shí)間（1、4、8、12、24小時(shí)）后大鼠精子的HYD陽(yáng)性反應(yīng)率較對(duì)照組下降，但結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(0.47＜t＜1.313，P

4、＞0.05)，2、4、6Gy照射組及對(duì)照組標(biāo)本透明質(zhì)酸酶反應(yīng)率各時(shí)間點(diǎn)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 2.精子CRISP2基因mRNA在×線照射后的表達(dá)水平變化。4、6 Gy x射線照射不同時(shí)間（1、4、8、12、24h時(shí)）后大鼠精子的CRISP2基因mRNA相對(duì)表達(dá)量均較對(duì)照組顯著下降(P＜0.05)，其中6 Gy照射24小時(shí)后相對(duì)表達(dá)量最低(P＜0.01)，而4Gy照射組與6Gy照射組相比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0

5、.05);2 Gy x射線照射8h后CRISP2 mRNA相對(duì)表達(dá)量下降有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);2 Gyx射線照射1、4h后及1Gy x射線照射不同時(shí)間(1、4、8、12、24h)后大鼠精子的CRISP2 mRNA相對(duì)表達(dá)量較對(duì)照組下降，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 3. X線照射下精子活力與CRISP2基因mRNA及HYD的關(guān)系。
　　 以0Gy照射組為對(duì)照組，其精子平均活力（A+B級(jí)）是(78.3

6、7±4.046)％，1、2Gy x射線照射不同時(shí)間（1、4、8、12、24小時(shí)）及4Gy x射線照射(1、4、8小時(shí))后，精子活力與正常對(duì)照組相比無(wú)明顯改變(P＞0.05);4Gy x射線照射12、24小時(shí)后大鼠精子活力顯著低于正常對(duì)照;6Gy x射線照射不同時(shí)間(1、4、8、12、24h)后，精子活力明顯低于對(duì)照組(P＜0.05)。精子活力與CRISP2基因mRNA及HYD的直線相關(guān)統(tǒng)計(jì)分析，得出呈直線相關(guān)，檢驗(yàn)直線，相關(guān)系數(shù)分別為R

7、=0.802(0.944)，F(xiàn)值=41.37(150.47)，P＜0.05。
　　 結(jié)論：
　　 1.不同劑量x射線照射可導(dǎo)致SD大鼠精子活力下降，這可能與其下調(diào)CRISP2基因的mRNA表達(dá)水平和HYD活性有關(guān)。
　　 2.精子活力指標(biāo)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)比單純精子常規(guī)參數(shù)可能更具反映其活力狀態(tài)。
　　 3.在一定劑量范圍內(nèi)(2Gy)，精子受到X線照射后，CRISP2基因mRNA相對(duì)表達(dá)量不同時(shí)間點(diǎn)下降程度不同，可