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1、目的:研究不同劑量X射線照射后1小時(shí)SD大鼠成熟精子頂體酶(acrosomal enzyme,ACE)活性及不同時(shí)間點(diǎn)線粒體COXⅡ基因 mRNA表達(dá)水平和線粒體膜電位(mitochondrial membrane potential,MMP)的影響,并探討電離輻射對(duì)精子功能的影響機(jī)制,為研究電離輻射對(duì)男性生殖功能的影響提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:應(yīng)用Precise直線加速器產(chǎn)生的X線局部照射活體SD大鼠外生殖器(劑量率為442.8
2、9cGy∕min),按輻射劑量0、1、2、4、6Gy隨機(jī)分為5大組,每大組按1、4、8、12、24h時(shí)間點(diǎn)再分為5組。以改良Kennedy法檢測(cè)大鼠成熟精子頂體酶活性,采用PCR技術(shù)檢測(cè)大鼠成熟精子線粒體COXⅡ基因mRNA轉(zhuǎn)錄水平;應(yīng)用熒光染料JC-1單色標(biāo)記法染色,常規(guī)顯微鏡下檢測(cè)精子線粒體膜電位的改變。
結(jié)果:1.2Gy、4Gy、6Gy照射組與0Gy對(duì)照組相比頂體酶活性顯著降低(P<0.05),照射組酶活性較0Gy對(duì)照組
3、有顯著降低;4Gy、6Gy照射組與2Gy照射組相比較頂體酶活性顯著降低(P<0.05);而4Gy照射組與6Gy照射組相比較則無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.1Gy X射線照射后1h精子COXⅡ mRNA轉(zhuǎn)錄水平與對(duì)照組相比有所升高(P<0.05),但在4、8、12、24h各時(shí)間點(diǎn)其轉(zhuǎn)錄水平與對(duì)照組比較則差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。2、4、6 Gy X射線照射后各時(shí)間點(diǎn)精子COXⅡ mRNA轉(zhuǎn)錄水平與對(duì)照組相比均下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義
4、(P<0.05),且照射劑量越大,COXⅡ mRNA轉(zhuǎn)錄水平越低;但各實(shí)驗(yàn)組隨時(shí)間的變化并無(wú)規(guī)律。
3.1Gy X射線照射組在不同時(shí)間點(diǎn)精子MMP均較對(duì)照組有所下降,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);在同一劑量不同時(shí)間點(diǎn),大鼠精子MMP隨時(shí)間的增加而降低,在24h時(shí)降到最低,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。2、4、6 Gy X射線照射后同一時(shí)間點(diǎn)大鼠精子MMP均較對(duì)照組顯著下降,且隨劑量的增加精子MMP也相應(yīng)降低,在6
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