乳鐵蛋白對(duì)去卵巢大鼠IGF-IR、IGFBP-2、IGFBP-4mRNA表達(dá)影響的研究.pdf

1、目的：旨在觀察乳鐵蛋白（Lactoferrin LF）對(duì)去卵巢大鼠IGF-IR/IGFBP-2/IGFBP-4mRNA基因表達(dá)的影響，探討乳鐵蛋白是否通過(guò)介導(dǎo)IGF-IR/IGFBP-2/IGFBP-4mRNA基因表達(dá)機(jī)制治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松。
　　方法：選取6個(gè)月大小，體重約在270g左右，雌性SD（Sprague-Dawley）大鼠70只，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，入組大鼠隨機(jī)分為去卵巢模型組（Ovx）60只與假手術(shù)組（Sham）10只

2、，把去卵巢大鼠模型組再次分組，隨機(jī)分為不同干預(yù)治療組6組，骨質(zhì)疏松模型組（Con組）10只，實(shí)驗(yàn)中作為對(duì)照組：[蒸餾水2ml/(只·天)灌胃]，牛血清白蛋白組（BSA組）10只：[100mg/kg/d+蒸餾水2ml，灌胃]，不同濃度劑量的乳鐵蛋白治療組LF1-3（LF1、LF2和LF3組各10只）：[0.1g/（kg·d）+蒸餾水2ml，1g/（kg·d）+蒸餾水2ml，2g/（kg·d）+蒸餾水2ml，灌胃]，雌激素治療組（E2組）1

3、0只[0.1 mg/（kg·周），肌肉注射]。連續(xù)干預(yù)治療6個(gè)月后，通過(guò)觀察乳鐵蛋白干預(yù)前后，體重有無(wú)明顯差異；通過(guò)制作HE石蠟病理切片,使用顯微鏡觀察骨組織結(jié)構(gòu)變化。再通過(guò)Real Time RT-PCR法即實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)，檢測(cè)去卵巢大鼠骨組織IGF-1R、IGFBP-2、IGFBP-4mRNA表達(dá)的改變。
　　結(jié)果：⑴乳鐵蛋白干預(yù)前，各組大鼠體重均無(wú)明顯差異，均P>0.05，大鼠去卵巢手術(shù)后，以各種方法干預(yù)治療6個(gè)月

4、后，除了E2組外，其余各組大鼠體重均明顯升高，均P<0.05，提示差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，體重增加最多的組為Con組，Con組大鼠均明顯重于Sham組和E2組，均P<0.05，提示差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，以不同濃度乳鐵蛋白進(jìn)行干預(yù)的LF1-3組及牛血清白蛋白組大鼠體重與Con組相比，雖然均比Con組體重低，但均P>0.05，提示無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。⑵骨組織HE染色病理切片顯示：Sham組、E2組骨小梁排列密集、飽滿，間距小，細(xì)胞數(shù)量多；而Con組、BSA

5、組骨小梁變細(xì)、斷裂，骨小梁距離增寬，排列稀疏，細(xì)胞數(shù)量少，骨小梁結(jié)構(gòu)出現(xiàn)較大的空白區(qū)域；而乳鐵蛋白灌胃組LF1-3介于二者之間，且骨小梁排列緊密程度LF3好于LF2，LF2好于LF1。表明成功建立去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松模型。⑶實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示：Con組IGFBP-2、 IGFBP-4 mRNA相對(duì)于Sham組，相對(duì)表達(dá)量均顯著增高，均P<0.01，差別有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；相對(duì)于Sham組，Con組IGF-1RmRNA相對(duì)表達(dá)量明顯降

6、低，均P<0.01，差別有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與Con組比較LF1-3組（100 mg/kg,1 g/kg and2 g/kg）與E2組IGFBP-2、IGFBP-4mRNA相對(duì)表達(dá)量明顯下降，且隨著乳鐵蛋白濃度的升高下降得越明顯，均P<0.01，差別有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；而LF2-3組（1 g/kg and2 g/kg）與E2組IGF-1R mRNA相對(duì)表達(dá)量均顯著高于Con組，且隨著乳鐵蛋白濃度的升高上升得越明顯，均P<0.05，差別有統(tǒng)計(jì)