SNCG促進(jìn)乳腺癌轉(zhuǎn)移的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一部分表達(dá)SNCG提示三陰性乳腺癌預(yù)后不良
　　目的：探索SNCG表達(dá)對(duì)三陰性乳腺癌患者的預(yù)后影響。
　　方法：收集2002-2011年間在我院接受治療的102例三陰性乳腺癌（Triple n egative breast cancer,TNBC）患者組織標(biāo)本及臨床資料。使用免疫組化方法檢測(cè)SNCG表達(dá)情況，按SNCG表達(dá)情況將病例分為SNCG陽(yáng)性和陰性組。使用Ka plan-Meier對(duì)兩組進(jìn)行生存分析，并使用COX回歸

2、估計(jì)SNCG風(fēng)險(xiǎn)值。
　　結(jié)果：34.5％（35/102）的TNBC為SNCG表達(dá)陽(yáng)性。SNCG陽(yáng)性三陰性乳腺癌患者的無(wú)病生存期和總生存期明顯短于SNCG陰性患者（P=0.013；P=0.002）。SNCG陽(yáng)性三陰性乳腺癌患者的局部復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)率為2.800(95%CI，1.193-6.574; P=0.018)。SNCG蛋白表達(dá)與三陰性患者的年齡，淋巴結(jié)浸潤(rùn)，病理分期沒(méi)有相關(guān)性，而與腫塊大小有明顯的相關(guān)性(P=0.032

3、，R=0.212)。
　　結(jié)論：與SNCG陰性的三陰性乳腺癌患者相比，SNCG陽(yáng)性的三陰性乳腺癌患者預(yù)后更差，SNCG可能成為三陰性乳腺癌的預(yù)后指標(biāo)。
　　第二部分 SNCG通過(guò)誘導(dǎo)EMT促進(jìn)乳腺癌轉(zhuǎn)移的實(shí)驗(yàn)研究
　　目的：研究SNCG與誘導(dǎo)上皮間質(zhì)化（Epithelial to Mesenchymal Transitio n，EMT）促進(jìn)乳腺癌轉(zhuǎn)移的相關(guān)性。
　　方法：收集81例乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌患者組織標(biāo)本，通

4、過(guò)免疫組化方法檢測(cè)SNCG和E-鈣粘蛋白（E-cadherin，E-cad）的表達(dá)情況。選取野生型SNCG陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞系T47D（WT-T47D）和野生型SNCG陰性表達(dá)細(xì)胞系MCF7（WT-M CF7）作為乳腺癌的模型細(xì)胞。轉(zhuǎn)染、慢病毒介導(dǎo)的RNA干擾技術(shù)被用于構(gòu)建T47D-SNCG沉默、MCF7-SNCG過(guò)表達(dá)兩組細(xì)胞模型。使用胰島素樣生長(zhǎng)因子Ⅰ（Insulin-like Growth Factor-Ⅰ，IGFⅠ）處理各組細(xì)胞后，通

5、過(guò)Realtime PCR技術(shù)從基因水平檢測(cè)各組模型的EMT標(biāo)志蛋白E-cadherin、波形蛋白（Vimenti n）、N-鈣粘蛋白（N-cadherin，N-cad）的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：免疫組化結(jié)果顯示SNCG陽(yáng)性表達(dá)組E-cad下調(diào)明顯多于SNCG陰性表達(dá)組，兩組E-cad下調(diào)率分別占25%和4%，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.007）。成功構(gòu)建T47D-SNCG沉默組、MCF7-SNCG過(guò)表達(dá)組細(xì)胞模型。Realtime

6、 PCR結(jié)果顯示過(guò)表達(dá)SNCG或沉默SNCG后，細(xì)胞的E-cad、N-cad、Vimentin mRN A水平并未發(fā)生明顯變化。經(jīng)IGFⅠ處理后，各細(xì)胞系明顯發(fā)生EMT變化，且SNCG陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞系EMT程度明顯高于SNCG陰性表達(dá)細(xì)胞系。WT-T47D+I GFⅠ的E-cad的mRNA水平較T47D-SNCG沉默+IGFⅠ降低3.3倍（P=0.002），N-cad和Vimentin的mRNA水平升高了1.4（P=0.003）和4倍（P

7、=0.008）。MCF7-SNCG過(guò)表達(dá)+IGFⅠ的E-cad的mRNA水平較WT-MCF7+IGFⅠ明顯降低了5.5倍（P=0.041），而N-cad和Vimentin升高了2.3倍（P=0.001）和1.4倍（P=0.008）。Transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示W(wǎng)T-T47D+IGFⅠ較T47D-SNCG沉默+IGFⅠ，MCF7-SNCG過(guò)表達(dá)+IGFⅠ較WT-MCF7+IGFⅠ遷移能力明顯增強(qiáng)。
　　結(jié)論：SNCG可以通過(guò)加強(qiáng)I