REV和ALV-J共感染對(duì)病毒血癥和抗體反應(yīng)的相互影響及REV傳播途徑的研究.pdf

1、禽網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病和禽J亞群白血病(AvianleukosisofsubgroupJ，AL-J)是禽類疾病中兩種重要的腫瘤性疾病。這類疾病雖然不一定直接導(dǎo)致禽的死亡，但它們能降低雞體對(duì)其它疾病的抵抗力，進(jìn)而給養(yǎng)禽業(yè)帶來很大的經(jīng)濟(jì)損失。最近實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)報(bào)告證明禽網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病病毒(Reticuloendotheliosisvirus，REV)與馬立克氏病病毒(Marek'sDiseaseVirus，MDV)等病毒的混合感染普遍存在，尤其是近年

2、來本實(shí)驗(yàn)室還報(bào)道了臨床上REV和ALV-J共感染。 為了研究禽網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病病毒(REV)、禽J亞群白血病病毒(ALV-J)共感染時(shí)對(duì)彼此病毒血癥及抗體生成的影響，將1日齡SPF雞200只隨機(jī)分成4組，平均每組50只。2日齡時(shí)，4個(gè)組每只雞分別腹腔接種：第一組接種0.2mlREV和ALV-J感染細(xì)胞培養(yǎng)上清混合液(比例1∶1)；第二組接種REV感染細(xì)胞培養(yǎng)上清；第三組接種ALV-J感染細(xì)胞培養(yǎng)上清；第四組接種滅菌Hank's液作

3、為陰性對(duì)照；常規(guī)程序進(jìn)行免疫；攻毒后在2周齡、3周齡、5周齡、7周齡時(shí)從各組中分別隨機(jī)取出30只雞，編號(hào)。其中6只無(wú)菌采集加抗凝劑的新鮮血液用于病毒血癥檢測(cè)，其余雞常規(guī)采血，分離血清供抗體檢測(cè)；病毒血癥的檢測(cè)采用病毒蝕斑法，同時(shí)用ELISA檢測(cè)雞群的抗體水平。 實(shí)驗(yàn)一結(jié)果表明：①ALV-J共感染后REV病毒血癥水平與REV單獨(dú)感染的相比差異均不顯著(P＞0.05)，而REV共感染后ALV-J病毒血癥水平與ALV-J單獨(dú)感染的相比

4、僅在2周齡時(shí)差異顯著(P＜0.05)。②ALV-J特異性抗體較REV特異性抗體產(chǎn)生得晚，ALV-J共感染對(duì)REV感染誘發(fā)的抗體反應(yīng)的影響不明顯，而REV共感染顯著減弱了雞體對(duì)ALV-J感染誘導(dǎo)的特異性抗體反應(yīng)；③進(jìn)一步對(duì)實(shí)驗(yàn)雞的病毒血癥與抗體水平進(jìn)行同步比較發(fā)現(xiàn)，REV感染后雞體血液當(dāng)中REV和相應(yīng)抗體共同存在的幾率較大，REV+ALV-J共感染組及單獨(dú)感染REV組在2周齡時(shí)病毒血癥和抗體反應(yīng)均為陽(yáng)性的比例為0，3周齡時(shí)REV+ALV-

5、J共感組和單獨(dú)感染REV組都出現(xiàn)了部分雞病毒血癥和抗體反應(yīng)均為陽(yáng)性(3/6和3/6)，直到7周齡這種現(xiàn)象還持續(xù)存在，ALV-J的共感染并未降低雞群中雞只病毒血癥和抗體反應(yīng)均為陽(yáng)性的比例；而ALV-J感染后雞體血液當(dāng)中ALV-J和相應(yīng)抗體共同存在的幾率很小，到5周齡和7周齡時(shí)ALV-Jd單獨(dú)感染組才有病毒血癥和抗體反應(yīng)均為陽(yáng)性雞只出現(xiàn)(2/6和2/6)；REV的共感染后，在整個(gè)檢測(cè)周期中未見病毒血癥和抗體反應(yīng)均為陽(yáng)性雞只，說明REV的共感

6、染明顯降低了雞群中雞只病毒血癥和抗體反應(yīng)均為陽(yáng)性的比例。 由于我國(guó)REV感染較為普遍，其傳播途徑也得到了重視。蚊子作為很多病毒的中間宿主引起人們的廣泛關(guān)注，因此為確證蚊子在REV傳播中的作用，在蚊子較多的夏季在已經(jīng)人工感染REVSNV株的雞群居住的禽舍內(nèi)捕捉了8批淡色庫(kù)蚊，另外在無(wú)禽舍的地方捕捉了2批淡色庫(kù)蚊作對(duì)照。通過常規(guī)分離病毒的方法成功分離到一株REVMOS-1株；針對(duì)REV的env基因設(shè)計(jì)了兩對(duì)引物，通過nest-PCR