竹節(jié)參總皂苷對(duì)脂肪性肝纖維化小鼠的預(yù)防保護(hù)作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的:本課題擬通過(guò)高脂飼料和豬血清聯(lián)合誘導(dǎo)小鼠肝纖維化模型,研究竹節(jié)參總皂苷對(duì)小鼠脂肪性肝纖維化的預(yù)防保護(hù)作用,并初步探討其可能的作用機(jī)制。
　　方法:48只BABL/C小鼠隨機(jī)分成四組:正常對(duì)照組,模型對(duì)照組和竹節(jié)參總皂苷低、高劑量組。除正常對(duì)照組給與普通飼料外,其余各組均給與高脂飼料造模,10g/只/d,同時(shí)竹節(jié)參總皂苷低、高劑量組分別灌胃給與100mg/kg、300mg/kg的竹節(jié)參總皂苷,1次/d,持續(xù)10W;從第5W開(kāi)始

2、,除正常對(duì)照組小鼠腹腔注射無(wú)菌水外,其余三組小鼠腹腔注射豬血清,0.1ml/只/W,在第6,7W時(shí)分別將血清稀釋3倍后,以同等體積腹腔注射。末次給藥并禁食12 h后,稱小鼠體重并記錄,處死小鼠。(1)測(cè)定血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)活性和甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、總膽汁酸(TBA)含量;(2)分離肝臟并拍照,稱取濕重計(jì)算肝臟指數(shù),取相同部位肝組織進(jìn)行HE、Mass

3、on和電鏡染色,分別進(jìn)行肝組織顯微和超微結(jié)構(gòu)形態(tài)分析;(3)取部分肝組織進(jìn)行羥脯氨酸含量的檢測(cè)(4)取部分肝組織,應(yīng)用PCR技術(shù)對(duì)COLLIα、α-SNA、TIMP、CHOP、GRP78的mRNA表達(dá)情況進(jìn)行分析;(5)另取部分肝組織,應(yīng)用western blotting技術(shù)分析COLLIα、GRP78和pJNK蛋白表達(dá)情況。
　　結(jié)果:竹節(jié)參總皂苷能夠明顯降低肝纖維化小鼠血清中ALT、AST活性,TG、TBA、LDL含量,升高H

4、DL含量(P﹤0.05);竹節(jié)參總皂苷各劑量組可以改善肝臟外觀并降低肝臟重量指數(shù);HE染色觀察發(fā)現(xiàn):竹節(jié)參總皂苷各劑量組可明顯改善肝臟組織脂肪變性、纖維組織增生和炎性細(xì)胞浸潤(rùn);Masson染色觀察發(fā)現(xiàn):竹節(jié)參總皂苷各劑量組能夠明顯抑制膠原纖維的產(chǎn)生;電鏡觀察發(fā)現(xiàn):竹節(jié)參總皂苷各劑量組能明顯改善內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體形態(tài)和脂肪變性;肝臟的PCR分析發(fā)現(xiàn):竹節(jié)參各劑量組可以下調(diào)COLLIα、α-SNA、TIMP、CHOP、GRP78的mRNA表達(dá);