柑橘愈傷組織倍性變異中細胞凋亡途徑的社會化控制.pdf

1、植物組織培養(yǎng)中普遍存在體細胞染色體數(shù)目變異現(xiàn)象，這是由于異常有絲分裂造成的。已有研究表明，部分植物在離體培養(yǎng)條件下，其染色體的多倍化變異往往會隨著時間延長而增加。然而，柑橘愈傷組織在繼代10多年后仍然具有較強的胚胎發(fā)生能力，染色體倍性組成卻保持了相對穩(wěn)定。前人推測二倍體愈傷組織中的四倍體細胞在不斷產(chǎn)生的同時以較高頻率的細胞凋亡方式被淘汰，從而維持四倍體細胞比例的穩(wěn)定。 為了驗證這一推測，本文將帶有綠色熒光標記的國慶一號二倍體細胞

2、和低密度包埋培養(yǎng)所得四倍體細胞純系混合懸浮培養(yǎng)，挑取四倍體細胞包埋切片，發(fā)現(xiàn)部分四倍體細胞呈典型的細胞凋亡特征。改變培養(yǎng)條件，統(tǒng)計凋亡率與共培養(yǎng)時間和所占比例的關(guān)系。結(jié)果表明，共培養(yǎng)2-7天內(nèi)，混合培養(yǎng)的四倍體凋亡率與單獨培養(yǎng)時差異顯著；當(dāng)樣品中四倍體細胞數(shù)多于二倍體時，四倍體表現(xiàn)出更高的凋亡率；凋亡率隨著時間的增加而增加，其中第2天凋亡率顯著上升。原位末端標記分析顯示，等量混合共培養(yǎng)10天時細胞凋亡率高達36.9％，高于形態(tài)學(xué)記數(shù)結(jié)果