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文檔簡介
1、石河子大學碩士學位論文人類神經(jīng)突起因子真核表達系統(tǒng)的構(gòu)建及功能的初步研究姓名:張峪涵申請學位級別:碩士專業(yè):生物化學與分子生物學指導教師:楊磊黃瑾20050501TheconstructionofeukaryoticexpressionsystemandprimaryfunctionalresearchofhumanneuritinPostgraduate:ZhangYuhanAdvisor:ProfessorYangleiAbstra
2、ct:Neurotrophicfactorsaregrowthfactorsorcytokinesthatareinduciblepolypeptidesandpermitintercellularcommunication,Neurotrophicfactorscallmodulatethedevelopmentofgrowth、maintenanceoffunction,anddifferentionofneuronalpopula
3、tionofnervoussystem,sotheyplayanimportantroleinsupportingtheinjurednervoussystemandneurodegerativedisorders,AnexplosionofinformationaboutneurotrophicfactorsissettingthestageforsignificantadvancesinneuraldiseasetherapyNeu
4、ritinwasanavelneurotrophicfactorwhichwasfirstreportedbyNediviasCandidatePlasticity—relatedgenesl5,onnaturein1993thenitwasnmnedbyIsraelscientistNaevein1997PreviousstudiesdemonstratedthatNeuritincaninduceneuritegrowth,prom
5、otetheoutgrowthandarborizationofneuriteBothBDNFandneuronalactivitycallactivetheexpressionofneuritinItsuggestthattheneuritinmaybeadownregulatedcofactorofBDNFandneuronalactivityNeuritinappliedforegroundinnerveregenerativef
6、ield,butthefunctionandmolecularmechanismofNeurifinisnotveryclearlysofarAtpresent,ahumanneuritineDNAwasclonedandthestructureandpotentialfunctionofitsproteinwaspredictedbybioinformaticsOnthebasisofpastworkweaimtoconstructe
7、ukaryoticexpressionsystemanddotheprimaryresearchofneuritinFirstly,thecodingsequenceofhumanneuritinwasclonedintopcDNA40eukaryoticexpressionvectorbyusinggeneticrecombinationtechniqueAfteranalysisbyrestrictionenzymedigestio
8、nandDNAsequencingtllerecombinantpcDNA40一neuritinplasmidwastransfectedintoPCI2cellsbyusingcationiclipid(Tfx20)FinallytheexpressionofneuritinwasdeterminedbyimmunocytochemistryTheresultshowedthatneuritinreadingframewascorre
9、ctTherecombinantplasmidcanexpressatmRNAlevelandproduceactiveNeuritinproteinineukaryoticcellsTheresearchappliedafoundmentalbasisforthefunotionandmechanismstudyofneuritininfutureKeywords:neuritin;eukaryoticexpressionvector
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