HBsAg確證實驗與CHB患者血清miRNA-122等指標的分析應用.pdf

1、目的：探討初診HBsAg檢測陽性患者標本進行抗體中和確證實驗的研究;觀察在CHB四個不同發(fā)病時期中，人外周血清中肝臟特異性miRNA-122表達量的變化和意義;探討血清HBV-DNA低復制的CHB患者相關指標的變化及意義。
　　方法：收集CLIA法定量檢測HBsAg陽性標本1974例，應用GICA、ELISA等方法復檢HBsAg并進行統(tǒng)計學分析;此外，對CLIA法HBsAg陽性而ELISA法陰性的標本進行了CLIA法中和確證實驗。

2、收集80例CHB患者標本，采用FQ-PCR法和CLIA等方法對miRNA-122、HBV-DNA、HbeAg、HbsAg和ALT進行測定，對結果進行比較和線性相關分析。收集HBV-DNA低復制的CHB患者標本229例，進行mIL-2R、IL-10、miRNA-122等指標進行比較分析。
　　結果：對CLIA法檢測的HBsAg陽性的標本使用GICA和ELISA兩種方法進行復檢后發(fā)現(xiàn)，GICA和ELISA法檢測HBsAg均有漏檢現(xiàn)象的

3、發(fā)生，其漏檢率分別占HBsAg陽性標本的9.1％(180/1974)和25.4％(501/1974)，而這些漏檢的標本主要集中在CMIA法HBsAg檢測值≤10.0IU/ml的樣本中，而該濃度范圍標本占HBsAg陽性標本的比例高達26.90％(531/1974)。本文將180例CMIA法HBsAg陽性標本而ELISA法漏檢的標本經(jīng)CMIA法中和確證實驗陽性率為96.67％(174/180)。其中有6例無法確認，通過HBV-DNA檢測與兩

4、周后隨訪確認3例為乙肝病毒感染病例，另3例排除。miRNA-122在CHB患者四個時期表達量均明顯升高，尤其在免疫耐受期和免疫清除期升高顯著（P＜0.01）;miRNA-122與HbeAg和HBV-DNA相關性不強(r=0.263，r=0.171)，與HbsAg和ALT相關性較強(r=0.597，r=0.767)。低復制CHB患者中e抗原陽性患者占38.00％，e抗原陰性患者占51.53％;229例患者ALT升高者占總數(shù)的66.81％，

5、患者血漿miRNA-122的表達量的變化與ALT濃度呈正相關（r=0.841）。e抗原陽性與e抗原陰性組IL-10、mIL-2R濃度與對照組比較均有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。
　　結論：ELISA等定性方法在低濃度HBsAg標本的檢測上與CLIA等定量方法相比存在明顯不足。實驗室對首診乙肝HBsAg檢測的標本應首選檢測靈敏度高的CLIA法進行檢測，對低濃度HBsAg陽性患者應通過采集雙份血清、中和試驗、HBV-DNA檢測以及隨訪