2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:在結(jié)腸癌中,鈣周期素結(jié)合蛋白(CacyBP/SIP)的入核可以促進結(jié)腸癌的發(fā)生發(fā)展,在人結(jié)腸癌 SW480細(xì)胞中,篩選出 CacyBP/SIP核轉(zhuǎn)位后與其相互作用的蛋白質(zhì)。
  方法:構(gòu)建 pGC-FU-CBP-SBP-cacyBP-3X Nuclear targeting sequences慢病毒載體并且包裝慢病毒上清,之后用病毒上清感染人 SW480細(xì)胞,Western blotting方法用來檢測感染病毒后SW480細(xì)

2、胞中融合蛋白CBP-SBP-cacyBP-3X Nuclear targeting sequences和內(nèi)源性 CacyBP/SIP的蛋白表達(dá)情況。串聯(lián)親和層析法和免疫沉淀法被用來純化與靶蛋白 CacyBP/SIP相互作用的下游蛋白復(fù)合物,之后行質(zhì)譜分析蛋白復(fù)合物的具體組成成分并分析數(shù)據(jù)結(jié)果。
  結(jié)果:CBP-SBP-cacyBP-3X Nuclear targeting sequences慢病毒包裝成功,病毒滴度為2×108

3、TU/mL。Western blotting方法從蛋白水平上證實了融合蛋白 CBP-SBP-cacyBP-3X Nuclear targeting sequences在人 SW480細(xì)胞的細(xì)胞核中的正確表達(dá)。串聯(lián)親和層析方法并未篩選與 CacyBP/SIP相互作用的下游信號分子,但是從免疫沉淀法篩選的蛋白復(fù)合物質(zhì)譜數(shù)據(jù)分析:肌動蛋白可能是與 CacyBP/SIP相互作用的一個有意義蛋白分子。
  結(jié)論:
  1.成功包裝 C

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