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文檔簡介
1、目的:觀察缺氧時(shí)M一3(神經(jīng)營養(yǎng)因子一3)對體外大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)元c—jun表達(dá)的影響,探討M-3對大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)元的保護(hù)作用及作用機(jī)理。 方法:體外原代培養(yǎng)大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)元,以石蠟油封閉造成缺氧條件,分為常規(guī)培養(yǎng)組與缺氧培養(yǎng)組(兩組依M~3終濃度不同各分成四個(gè)亞組:0、l、30、100ng/ml組),以光鏡、電鏡觀察細(xì)胞在缺氧條件下的形態(tài)學(xué)變化,MTT法比較各組細(xì)胞的活力,并采用RT—PCR、免疫細(xì)胞化學(xué)法(ICC)及We
2、stern—blot法檢測各組細(xì)胞c—junmRNA及蛋白水平的表達(dá)。 結(jié)果:石蠟油封閉能誘導(dǎo)神經(jīng)元缺氧;M一3對常規(guī)神經(jīng)元有維持存活作用,對缺氧神經(jīng)元有明顯保護(hù)作用,NT-3能夠促進(jìn)神經(jīng)元突起生長,減輕缺氧損害;RT一PCR、ICC及Western—blot法分別從基因與蛋白水平顯示M一3能夠上調(diào)常規(guī)與缺氧培養(yǎng)神經(jīng)元c—jun的表達(dá)且呈劑量依賴性。 結(jié)論:M一3能夠促進(jìn)常規(guī)神經(jīng)元的存活,減輕缺氧對大腦皮質(zhì)神經(jīng)元的損害作
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