靜磁場(chǎng)對(duì)鼠成骨細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的影響.pdf

1、目的：觀察體外培養(yǎng)的大鼠顱骨成骨細(xì)胞，在不同強(qiáng)度靜磁場(chǎng)作用下，不同時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞的增殖情況，并進(jìn)一步研究在適宜強(qiáng)度靜磁場(chǎng)作用下，細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的變化，以期進(jìn)一步探討靜磁場(chǎng)在促成骨細(xì)胞增殖中可能的作用機(jī)制。 方法: 1、細(xì)胞培養(yǎng) 原代培養(yǎng)大鼠顱骨成骨細(xì)胞，并進(jìn)行細(xì)胞的形態(tài)觀察，用堿性磷酸酶染色和鈣結(jié)節(jié)染色法作細(xì)胞鑒定。 2、MTT法檢測(cè)成骨細(xì)胞增殖率 檢測(cè)成骨細(xì)胞在0Gs、260Gs、440Gs、90

2、0Gs的磁場(chǎng)強(qiáng)度作用下，24h、48h、72h的增殖率，每組取測(cè)得結(jié)果的平均值作為最終結(jié)果。 3、熒光測(cè)鈣 選用440Gs強(qiáng)度的靜磁場(chǎng)，利用數(shù)字化熒光顯微鏡系統(tǒng)和熒光雙波長分光光度計(jì)觀察和測(cè)定鈣離子在細(xì)胞內(nèi)的分布及濃度變化，其中鈣離子濃度值參照特定公式進(jìn)行計(jì)算后各組取平均值。 4、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS for Windows 11.0統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析。單因素方差分析(ANOVA)用于比較成骨

3、細(xì)胞增殖率，Dunnett-t檢驗(yàn)用于比較成骨細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度值。顯著性水平定為：P<00.5時(shí)有顯著性差異，P<0.01時(shí)有高度顯著性差異。 結(jié)果: 1、細(xì)胞培養(yǎng) 原代培養(yǎng)的成骨細(xì)胞，貼壁生長，形態(tài)呈梭形、三角形或多角形，堿性磷酸酶染色和鈣結(jié)節(jié)染色呈陽性著色。 2、MTT方法檢測(cè) 只有磁場(chǎng)強(qiáng)度為440Gs時(shí)，成骨細(xì)胞在48h內(nèi)，出現(xiàn)明顯增殖(P<0.01)。靜磁場(chǎng)作用72h時(shí)檢測(cè)，440Gs組和

4、900Gs組經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析與OGs之間存在高度顯著性差異(P<0.01)。 3、熒光測(cè)鈣 數(shù)字化熒光顯微鏡系統(tǒng)觀察，靜磁場(chǎng)作用前后胞內(nèi)鈣離子熒光強(qiáng)度基本沒有變化，成骨細(xì)胞中部層面內(nèi)，熒光信號(hào)較強(qiáng)，細(xì)胞核內(nèi)熒光信號(hào)最強(qiáng)，且在同一層面內(nèi)鈣熒光信號(hào)強(qiáng)度不均勻。成骨細(xì)胞在靜磁場(chǎng)作用5min、10min時(shí)，鈣離子濃度與對(duì)照組比較無顯著性差異，作用15min時(shí)，經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析與對(duì)照組之間存在高度顯著性差異(P<0.01)。 結(jié)論: