清胰化積復(fù)方對(duì)胰腺癌化療協(xié)同作用的研究.pdf

1、研究背景 胰腺癌是消化系統(tǒng)常見的惡性腫瘤之一，化療是胰腺癌重要的治療手段。然而，胰腺癌細(xì)胞多對(duì)化學(xué)抗癌藥物不敏感，其中多藥耐藥基因(Mulnidrug-resistancegenel，MDR)及其表達(dá)產(chǎn)物(P—gp)是研究最早也最為廣泛的內(nèi)容之一[1]。而近年來的研究提示Bcl-2基因家族的過度表達(dá)與胰腺癌對(duì)化療不敏感亦相關(guān)[2]。 研究表明，中藥復(fù)方、單味中藥、中藥提取物及其有效成分可以通過逆轉(zhuǎn)MDR、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡達(dá)到

2、對(duì)化療藥物的增效作用。已有的研究表明清胰化積復(fù)方(QYHJ方)具有誘導(dǎo)S180腫瘤細(xì)胞凋亡的作用，對(duì)荷SWl990人胰腺癌裸小鼠胰腺癌的生長有抑制作用[3]。此外，胰腺癌臨床研究中也少見類似的報(bào)道。因此，本課題希望通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床回顧性研究，初步了解QYHJ方對(duì)胰腺癌化療的協(xié)同作用及其機(jī)理。 目的 實(shí)驗(yàn)研究： 采用荷SWl990人胰腺癌裸小鼠模型，觀察健擇加QYHJ方對(duì)SWl990胰腺癌裸小鼠的抑瘤作用，探索Q

3、YHJ方與健擇合用的可能機(jī)理。 臨床研究： 采用壽命表法，通過88例中晚期胰腺癌患者回顧性研究，比較單用化療、化療與QYHJ方以及非QYHJ中藥聯(lián)合治療后的差異。 方法 實(shí)驗(yàn)研究：1)第一次實(shí)驗(yàn)：選用SWl990人胰腺癌細(xì)胞接種于BALB／C—nu／nu裸小鼠皮下，建立動(dòng)物移植瘤模型，造模后1周，隨機(jī)分5小組(陰性對(duì)照組、健擇組、健擇力[IQYHJ方高、中、低三個(gè)劑量組)進(jìn)行治療，定期測量腫瘤直徑，描繪生

4、長曲線；給藥2l天后處死全部裸小鼠，取瘤組織，稱重計(jì)算各組抑瘤率；觀察各組荷瘤小鼠治療后血常規(guī)、肝腎功能指標(biāo)；流式細(xì)胞儀方法檢測健擇組及健擇聯(lián)合復(fù)方組荷瘤小鼠瘤體MDR-mRNA表達(dá)及細(xì)胞凋亡率。2)第二次實(shí)驗(yàn)：選用SWl990胰腺癌細(xì)胞接種于BALB／C-nu／nu裸小鼠皮下建立動(dòng)物移植瘤模型，造模后1周，隨機(jī)分6小組(陰性對(duì)照組、健擇l倍劑量組及QYHJ方中劑量組、QYHJ方中劑量加健擇l／4、1／2、1倍劑量組)進(jìn)行治療，測量腫瘤

5、直徑，描繪生長曲線；給藥25天后處死全部裸小鼠，取瘤組織，稱重計(jì)算各組抑瘤率；免疫組化法檢測陰性對(duì)照組、健擇組及健擇聯(lián)合復(fù)方各劑量組荷瘤小鼠瘤體Bcl-2蛋白的表達(dá)。 臨床研究：分組方法：我院1990年1月一2004年12月依次入院未接受根治性手術(shù)的胰腺癌患者共303例，其中222例獲得病理確診。222例中，112例采用了中藥和／或化療，88例資料記錄完整。根據(jù)有無給予中藥，將88例患者分成兩組：化療合用中藥組55例，化療對(duì)照組

6、33例：在化療加中藥組55例中，根據(jù)中藥處方將患者再分為A、B兩組：A組使用化療藥物同時(shí)，加服非QYHJ中藥煎劑至少1月以上；B組加服QYHJ煎劑至少1月以上。 觀察指標(biāo)：生存期、肝腎功能改變。 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用壽命表法 結(jié)果 實(shí)驗(yàn)研究：(1)健擇加QYHJ方中劑量組對(duì)人胰腺癌SWl990細(xì)胞的抑瘤率為92．69％，明顯高于健擇單藥的88．77％(P<0．05)，健擇1／2劑量加QYHJ方組的抑瘤率為77．

7、73％，與單用健擇1倍劑量的抑瘤率73．93％比較，兩者相當(dāng)；(2)健擇加QYHJ方各劑量聯(lián)合用藥后，裸小鼠谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、尿素氮和肌酐均高于健擇單藥(P>0．05)；(3)流式細(xì)胞儀檢測提示健擇加QYHJ方高、中、低劑量組治療后MDR表達(dá)均值在34．01±5．16與51．44±8．37之間，低于健擇單藥組的69．57±5．71(P<0．05)；健擇加QYHJ方中劑量組細(xì)胞凋亡數(shù)均值為30．75±1．90，高于健擇單藥21．33

8、±4．07(P<0．05)；(4)免疫組化方法檢測健擇中劑量加QYHJ方聯(lián)合治療后瘤體內(nèi)Bcl一2蛋白表達(dá)低于生理鹽水和健擇l倍劑量組(P<0．05)。 臨床研究：(1)中藥聯(lián)合化療組1年、2年、3年、4年、5年的生存率和中位生存時(shí)間分別是24．62％(13例)、14．73％(7例)、14．73％(3例)、14．73％(1例)、M．73％(1例)、161天，明顯高于單純化療組的15．15％(5例)、6．06％(1例)、6．06％

9、(1例)、6．06％(1例)、O．00％(O例)、119天(P