MMPs-TIMPs在MsPGN大鼠腎組織的表達(dá)及補(bǔ)腎活血法中藥的影響.pdf

1、目的：通過(guò)建立系膜增生性腎小球腎炎大鼠模型，觀察腎組織基質(zhì)金屬蛋白酶及組織抑制劑的表達(dá)及補(bǔ)腎活血法中藥對(duì)這些因子表達(dá)的影響。通過(guò)本研究確定補(bǔ)腎活血法中藥在抑制系膜細(xì)胞增生，減少細(xì)胞外基質(zhì)積聚，防治腎小球硬化方面的確切療效。 方法：取雄性SD大鼠54只，實(shí)驗(yàn)設(shè)正常對(duì)照組、模型組、補(bǔ)腎活血法藥物干預(yù)組，每組分2周、4周、8周時(shí)間點(diǎn)，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)6只大鼠。分別進(jìn)行常規(guī)病理學(xué)檢查，免疫組化檢測(cè)腎組織MMP-2、TIMP-2、MT1-MMP

2、、MMP-10、TIMP-1、TGFβ1、IV型膠原和LN的表達(dá)，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)腎皮質(zhì)MMP-2、TIMP-2、MT1-MMP及MMP-3、MMP-10、TIMP-1和TGFβ1蛋白表達(dá)，原位雜交檢測(cè)腎皮質(zhì)MMP-2、TIMP-2、MMP-10、TIMP-1mRNA的表達(dá)，腎皮質(zhì)MMP-2酶活性分析。 結(jié)果：模型組大鼠隨病程進(jìn)展腎小球逐漸增大，系膜基質(zhì)增多，腎小球基底膜增厚。免疫組化染色顯示陽(yáng)性顆粒均主要定位于腎小球和腎小管，模

3、型組較對(duì)照組MMP-2、MT1-MMP表達(dá)減少，而藥物干預(yù)組較模型組表達(dá)減少程度輕；模型組較對(duì)照組TIMP-2、TGFβ1、MMP-3、10、TIMP-1、IV型膠原和LN的表達(dá)增多，而藥物干預(yù)組較模型組表達(dá)增多程度輕。流式細(xì)胞儀檢測(cè)顯示，4周和8周模型組MMP-2的FI相對(duì)值較對(duì)照組降低，在統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異具有顯著性(P<0.01或<0.05)，而各期模型組TIMP-2和TGFβ1的F1相對(duì)值較對(duì)照組升高，MT1-MMP的相對(duì)值較對(duì)照組降

4、低，差異具有顯著性(P<0.01)。隨著系膜增生性腎小球腎炎大鼠病程進(jìn)展，MMP-2和MT1-MMP表達(dá)降低而TIMP-2和TGFB1表達(dá)升高(P<0.01或<0.05)。模型組中MMP-3、10FI相對(duì)值較對(duì)照組升高，兩組差異有顯著性(P<0.01)，4、8周模型組TIMP-1FI相對(duì)值較對(duì)照組升高，兩組差異有顯著性(P<0.01)，各用藥組與模型組相比表達(dá)有不同程度的減弱。隨病程進(jìn)展MMP-2mRNA表達(dá)降低而TIMP-2mRNA表

5、達(dá)增強(qiáng)，用藥組較模型組相比MMP-2mRNA升高而TIMP-2mRNA不同程度降低。隨著病程進(jìn)展MMP-10、TIMP-1mRNA相對(duì)含量及積分光密度均增強(qiáng)，差異均有顯著性(P<0.01或0.05)，各用藥組與模型組相比表達(dá)有不同程度的減弱。隨病程進(jìn)展，MMP-2活性減低，而補(bǔ)腎活血法治療后72KDMMP-2增高，活性部分恢復(fù)。 結(jié)論：腎組織MMPs表達(dá)降低、活性減弱，TIMPs表達(dá)升高或者M(jìn)MPs/TIMPs比例下降是導(dǎo)致腎小