泄?jié)峤舛尽⒒钛ńj(luò)中藥對(duì)糖尿病腎病大鼠的腎保護(hù)作用及對(duì)腎組織PKC和TGF-β1的影響.pdf

1、目的:本研究應(yīng)用高糖高脂飼料聯(lián)合鏈脲佐菌素(Streptozotocin，STZ)復(fù)制糖尿病(diabetes mellitus，DM)大鼠模型，給予泄?jié)峤舛?、活血通絡(luò)中藥及厄貝沙坦對(duì)該模型進(jìn)行干預(yù)，通過觀察大鼠的尿蛋白、生化指標(biāo)、腎臟病理形態(tài)學(xué)變化及腎組織蛋白激酶C(protein kinase C，PKC)和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)的表達(dá)水平，來探討泄?jié)峤舛?、活?/p>

2、通絡(luò)中藥的腎保護(hù)作用及可能機(jī)制。
　　方法:健康雄性SD大鼠85只，體重160-180g，適應(yīng)性飼養(yǎng)一周，測(cè)定血糖和尿蛋白均為陰性后，隨機(jī)選取15只為正常組(NG)，其余70只為造模組。正常組予以普通飼料喂養(yǎng)，造模組予以高糖高脂飼料喂養(yǎng)，12周后造模組給予腹腔注射STZ35mg/kg，正常組大鼠予以腹腔注射相應(yīng)劑量的枸櫞酸緩沖液。72小時(shí)后尾靜脈測(cè)隨機(jī)血糖≥16.7mmol/L為模型復(fù)制成功，死亡和血糖不達(dá)標(biāo)的大鼠予以剔除。模型復(fù)

3、制成功的大鼠隨機(jī)分為模型組(MG)17只、中藥組(ZG)17只、西藥組(XG)17只、加方組（中藥聯(lián)合西藥組）(JG)16只。治療組予相應(yīng)藥物溶液灌胃，正常組與模型組予相當(dāng)量的生理鹽水，共給藥16周。分別于給藥期間第4周、8周、12周末測(cè)體重、血糖及尿蛋白。于給藥第16周末，留取大鼠24小時(shí)尿液，測(cè)定24小時(shí)尿蛋白定量，動(dòng)物麻醉狀態(tài)下腹主動(dòng)脈取血檢測(cè)生化指標(biāo)，摘取右側(cè)腎臟并稱重，留取腎臟標(biāo)本進(jìn)行光鏡、電鏡、免疫組化和Real-Time

4、PCR觀測(cè)。
　　結(jié)果:
　　1、各組大鼠的體重、右腎重及腎臟肥大指數(shù)KI(kidney hypertrophy index)（KI=右腎重/體重）
　　與正常組相比，各治療組和模型組體重顯著減輕(P＜0.05)，模型組與各治療組相比體重?zé)o明顯差異(P＞0.05);各組大鼠的右腎重?zé)o顯著差異(P＞0.05);各組大鼠的腎臟肥大指數(shù)比較，模型組和各治療組明顯高于正常組(P＜0.05)，模型組與各治療組相比沒有明顯差異（P

5、＞0.05）。
　　2、各組大鼠的24 h尿蛋白定量(UTP)
　　各治療組和模型組的24 h尿蛋白定量比正常組明顯升高(P＜0.05)，各治療組比模型組明顯降低(P＜0.05);各治療組之間比較，加方組的24h尿蛋白定量比中藥組和西藥組降低（P＜0.05）;中藥組和西藥組相比無明顯差異（P＞0.05）。
　　3、各組大鼠的血清總蛋白(TP)，白蛋白(ALB)比較
　　各治療組和模型組血清總蛋白和白蛋白比正常組均

6、降低(P＜0.05)，各治療組的血清總蛋白和白蛋白比模型組明顯升高(P＜0.05);各治療組之間比較，加方組血清總蛋白和白蛋白比中藥組和西藥組升高(P＜0.05);中藥組和西藥組相比無明顯差異（P＞0.05）。
　　4、各組大鼠血清總膽固醇(TC)，甘油三酯(TG)的比較
　　各治療組和模型組的TC，TG比正常組顯著升高(P＜0.05)，各治療組的TC，TG比模型組明顯降低(P＜0.05);各治療組之間比較，加方組的TC，T

7、G低于中藥組和西藥組(P＜0.05);中藥組和西藥組相比無明顯差異（P＞0.05）。
　　5、各組大鼠血肌酐(Scr)，尿素氮(BUN)的比較
　　正常組、模型組、西藥組、中藥組及加方組之間大鼠的血清肌酐和尿素氮水平無明顯差異（P＞0.05）。
　　6、各組大鼠糖化血紅蛋白(HbA1c)的比較
　　各治療組和模型組的的糖化血紅蛋白水平比正常組明顯升高(P＜0.05)，加方組和中藥組的糖化血紅蛋白水平低于西藥組和模

8、型組(P＜0.05)，加方組和中藥組相比無明顯差異(P＞0.05)，模型組和西藥組之間無明顯差異（P＞0.05）。
　　7、腎臟病理形態(tài)學(xué)觀察
　　7.1光鏡觀察
　　正常組大鼠腎小球結(jié)構(gòu)完整清晰，未見明顯肥大，腎小球毛細(xì)血管基底膜無增厚，系膜組織無增生，基質(zhì)無明顯改變。模型組大鼠腎小球肥大，基底膜明顯增厚，系膜基質(zhì)增多。與正常組相比，各治療組大鼠腎小球均有程度不同的病理改變，程度較模型組輕。各治療組之間相比無明顯差別

9、。
　　7.2電鏡觀察
　　正常組大鼠的腎小球毛細(xì)血管基底膜均勻無增厚，結(jié)構(gòu)清晰，足突分布均勻、無融合;模型組大鼠的腎小球毛細(xì)血管基底膜增厚，內(nèi)皮細(xì)胞明顯增生，伴有足突廣泛融合。各治療組出現(xiàn)程度不同的病理改變，較模型組為輕。各治療組之間相比無明顯差別。
　　8、大鼠腎組織TGF-β1 mRNA表達(dá)情況的比較
　　與正常組相比，各治療組和模型組TGF-β1mRNA的表達(dá)明顯增加(P＜0.05);與模型組相比，各治療

10、組TGF-β1mRNA的表達(dá)均明顯降低(P＜0.05);各治療組之間比較，加方組TGF-β1mRNA的表達(dá)低于中藥組和西藥組(P＜0.05)，中藥組和西藥組相比無明顯差異（P＞0.05）。
　　9、免疫組化染色法檢測(cè)腎組織PKC、TGF-β1表達(dá)
　　PKC、TGF-β1在正常組、模型組和各治療組中均有表達(dá)，兩者表達(dá)部位均主要位于腎小管上皮細(xì)胞，而在腎小球內(nèi)只有少量表達(dá)或基本無表達(dá)。與正常組相比，各治療組和模型組PKC、TG

11、F-β1的表達(dá)明顯增加(P＜0.05);與模型組相比，各治療組PKC、TGF-β1的表達(dá)均明顯降低(P＜0.05);治療各組間比較，加方組PKC、TGF-β1的表達(dá)低于中藥組和西藥組(P＜0.05)，中藥組和西藥組相比無明顯差異(P＞0.05)。
　　結(jié)論:
　　1、泄?jié)峤舛?、活血通絡(luò)中藥可以降低大鼠尿蛋白排泄及血糖、血脂水平，提高血清總蛋白、白蛋白水平，減輕腎臟病理改變，延緩DN病理的進(jìn)展。
　　2、泄?jié)峤舛尽⒒钛?/p>