黃芪對糖尿病腎病大鼠腎間質(zhì)Wnt-β-catenin信號通路及TGF-β1表達(dá)的影響.pdf

1、目的：觀察黃芪（Atragalus mongholicus，AM）對糖尿病腎病(Diabetic nephropathy，DN)大鼠腎間質(zhì)中wnt/β-Catenin信號通路及轉(zhuǎn)化生長因子-β1（Transforming growth factor-β，TGF-β1）表達(dá)情況的影響，探討其抗糖尿病腎病腎間質(zhì)纖維化的作用機(jī)制。
　　 方法：采用單次空腹腹腔注射鏈脲佐菌素(Streptozocin,STZ)60mg/kg制備糖尿病大

2、鼠模型。4周后測定24h尿蛋白排泄量，以24h尿蛋白定量≥30mg確定DN大鼠模型成功(n=48)。48只DN大鼠隨機(jī)分為4組：DN模型組(DN組)、黃芪治療組(DA組)、DN模型組+氯沙坦治療組(DL組)、DN模型組+黃芪聯(lián)合氯沙坦治療組(AL組)，每組12只。選取12只健康雄性wistar大鼠作為正常對照組(N組)。第4、8、12周末，收集尿液，檢測24h尿蛋白定量。連續(xù)給藥12周后，記錄大鼠體重，并檢測血清尿素氮(blood ur

3、ine nitrogen，BUN)、肌酐(Serum creatinine,Scr)；處死大鼠，留取腎組織行HE及Masson染色觀察腎間質(zhì)病理改變，采用免疫組織化學(xué)技術(shù)及實(shí)時熒光定量PCR(realtime fluorescence quantitative chain reaction，F(xiàn)Q-PCR)檢測腎間質(zhì)中Wnt4、β-catenin及TGF-β1蛋白及mRNA的表達(dá)。
　　 結(jié)果：與N組比較，12周末DN組、DA組、

4、DL組和AL組大鼠24h尿蛋白定量、血清BUN、Scr明顯增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。DA組、DL組和AL組作兩兩比較，AL組24h尿蛋白定量、血清BUN、Scr表達(dá)量下降更為明顯，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。DA組與DL組相比各指標(biāo)表達(dá)量差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。Wnt4、β-catenin及TGF-β1蛋白在腎問質(zhì)及腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)僅有微量表達(dá)。與N組比較，12周未DN組、DA組、DL組和AL組腎間質(zhì)Wnt

5、4、β-catenin及TGF-β1蛋白表達(dá)量明顯增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。DA組、DL組和AL組作兩兩比較，AL組Wnt4、β-catenin及TGF-β1蛋白表達(dá)量下降更為明顯，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。DA組與DL組相比各指標(biāo)表達(dá)量差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。FQ-PCR結(jié)果顯示W(wǎng)nt4、β-catenin和TGF-β1 mRNA在各組大鼠腎組織中的表達(dá)與Wnt4、β-catenin及TGF-β1蛋白表