化痰化瘀法調(diào)控多囊卵巢模型大鼠MMPs-TIMPs平衡表達的研究.pdf

1、目的：運用脫氫表雄酮誘導(dǎo)SD大鼠多囊卵巢綜合征模型，研究多囊卵巢模型大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶及其組織抑制因子（MMPs-TIMPs）的平衡失調(diào)，并運用基于化痰化瘀法的中藥復(fù)方三貝地甲煎來調(diào)控多囊卵巢模型大鼠MMPs-TIMPs的平衡表達，為化痰化瘀法治療多囊卵巢綜合征提供科學(xué)依據(jù)。
　　方法：
　　1.每日于模型組大鼠頸背部皮下注射DHEA溶液（6mg/0.2ml/100g），連續(xù)注射20天誘導(dǎo)SD大鼠建立多囊卵巢綜合征模型，采用

2、ELISA法檢測空白組和模型組大鼠的生殖激素 T、LH、FSH值，血糖及胰島素值等，制作卵巢病理切片觀測組織學(xué)指標(biāo)，驗證DHEA能建立PCOS模型，并采用QPCR法檢測卵巢MMP-2mRNA、MMP-9mRNA、TIMP-1mRNA、TIMP-2mRNA的2-△△CT值以及MMPs/TIMPs的比值，研究PCOS狀態(tài)下大鼠卵巢 MMPs-TIMPs的平衡表達。所有數(shù)據(jù)均應(yīng)用SPSS18.0統(tǒng)計軟件進行整理和分析。計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（

3、x±s）形式表示，兩組之間比較采用獨立樣本t檢驗。
　　2.應(yīng)用DHEA制作PCOS模型后，將大鼠分為空白組、生理鹽水組、達因組、二甲雙胍組、中藥三貝地甲煎高、中、低劑量組共7組，分別灌服相應(yīng)藥物，同時每日陰道脫落細胞學(xué)涂片，當(dāng)模型組某組大鼠50％以上個體出現(xiàn)第1個正常排卵周期時，處死全體動物，采用ELISA法檢測各組的生殖激素T、LH、FSH值，血糖及胰島素值等，制作卵巢病理切片觀測組織學(xué)指標(biāo)，采用 QPCR法檢測卵巢MMP-2

4、mRNA、MMP-9mRNA、TIMP-1mRNA、TIMP-2mRNA的2-△△CT值以及MMPs/TIMPs的比值，對比各組藥物產(chǎn)生的不同效果，研究各組藥物通過調(diào)整 MMPs-TIMPs的平衡而治療 PCOS的機理，特別是化痰化瘀中藥三貝地甲煎對PCOS大鼠MMPs-TIMPs平衡表達的調(diào)控作用。所有數(shù)據(jù)均應(yīng)用SPSS18.0統(tǒng)計軟件進行整理和分析。計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）形式表示，多組比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用L

5、SD-t檢驗。
　　結(jié)果：
　　1.DHEA誘導(dǎo)的SD雌大鼠出現(xiàn)卵巢指數(shù)明顯升高，卵巢形態(tài)學(xué)發(fā)現(xiàn)成熟卵泡減少、閉鎖卵泡增多、囊狀擴張卵泡增多，血清T值增高，LH值增高，空腹血糖、空腹胰島素、胰島素抵抗指數(shù)均較空白組顯著升高，基本符合PCOS的病理特點，且卵巢MMPs/TIMPs比值升高。
　　2.基于化痰化瘀法的三貝地甲煎中藥復(fù)方能夠降低PCOS大鼠卵巢指數(shù)，改善PCOS大鼠的卵巢形態(tài)學(xué)變化，降低PCOS大鼠血T值，降