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文檔簡介
1、目的:
胰島素抵抗是一種常見的致動(dòng)脈粥樣硬化性疾病,也是肥胖、血脂異常、2型糖尿病、冠心病等疾病的主要病理生理特征。胰島素抵抗可促進(jìn)炎癥因子TNF-α分泌,而TNF-α亦可通過多種途徑參與IR的發(fā)生發(fā)展。研究發(fā)現(xiàn)從葫蘆巴種子中提取的4-羥基異亮氨酸對胰島素抵抗有改善作用,但其具體機(jī)制尚不明確。本研究通過誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞產(chǎn)生胰島素抵抗,來探討4-HIL改善胰島素抵抗的相關(guān)分子機(jī)制。
方法:
我們使用胰島素和
2、高糖來誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞,以建立胰島素抵抗細(xì)胞模型,通過葡萄糖氧化酶測定試劑盒檢測其葡萄糖攝取量來確定模型成功的條件。在胰島素抵抗細(xì)胞中加入濃度梯度的4-HIL,通過ELISA法檢測其對TNF-α分泌的影響,Western-blot法測定其對TACE/TIMP3、GLUT4、IRS-1、IRS-2及磷酸化IRS-1(Ser307)的蛋白表達(dá)水平。
結(jié)果:
經(jīng)胰島素和高糖誘導(dǎo)的胰島素抵抗HepG2細(xì)胞中出現(xiàn)葡萄糖攝取減
3、少,加入4-HIL可以增加其葡萄糖攝取量,并成劑量依賴性。ELISA法示4-HIL能減少TNF-α的分泌,Western-blot法示4-HIL能抑制TACE的蛋白表達(dá),增加TIMP3的表達(dá)水平;使GLUT4、IRS-1蛋白表達(dá)水平升高,降低磷酸化IRS-1(Ser307)的蛋白表達(dá),但對IRS-2的蛋白表達(dá)無影響。
結(jié)論:
4-羥基異亮氨酸通過調(diào)節(jié)TACE/TIMP3系統(tǒng)來下調(diào)TNF-α的表達(dá),從而改善胰島素抵抗,
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