4-羥基異亮氨酸對(duì)TNF-α誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞糖原合成減少的作用及機(jī)制.pdf

1、目的：4-羥基異亮氨酸（4-HIL）是從葫蘆巴種子中提取的治療2型糖尿病的一種非蛋白氨基酸。有研究報(bào)道4-HIL可改善胰島素抵抗，但具體機(jī)制未明。TNF-α可通過多種途徑誘導(dǎo)胰島素抵抗，抑制糖原合成。本實(shí)驗(yàn)用TNF-α建立HepG2細(xì)胞胰島素抵抗模型以研究4-HIL對(duì)該模型糖原合成的作用及分子機(jī)制。
　　方法：HepG2細(xì)胞共分八組：空白對(duì)照組、5μmol/L4-HIL組、10μmol/L4-HIL組、20μmol/L4-HIL組

2、、TNF-α組、TNF-α+5μmol/L4-HIL組、TNF-α+10μmol/L4-HIL組、TNF-α+20μmol/L4-HIL組。應(yīng)用糖原試劑盒分別檢測各組細(xì)胞的糖原含量，Western-blot檢測JNK、IRS-1、Akt、GSK及P-JNK、P-Akt（Ser473）、P-IRS-1（Ser307）、P-GSK的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：與空白對(duì)照組相比，5μmol/L4-HIL組、10μmol/L4-HIL組或20μ

3、mol/L4-HIL組糖原含量均無明顯差異(P>0.05)；TNF-α組糖原含量下降(P<0.05)，提示成功建立HepG2胰島素抵抗細(xì)胞模型。與TNF-α組相比，TNF-α+20μmol/L4-HIL組糖原水平升高（P<0.05），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；而TNF-α+5μmol/L組或TNF-α+10μmol/L4-HIL組并無明顯差異(P>0.05)。Western-Blot檢測結(jié)果：與空白對(duì)照組相比，20μmol/L4-HIL組 P

4、-IRS-1/IRS-1比值降低(P<0.05)，而P-JNK/JNK比值無明顯差異(P>0.05)；TNF-α組P-IRS-1/IRS-1和P-JNK/JNK比值顯著升高(P<0.001)，P-AKT/AKT和P-GSK/GSK比值顯著降低(P<0.001)；與TNF-α組相比，TNF-α+20μmol/L4-HIL組P-IRS-1/IRS-1比值顯著降低(P<0.001)， P-JNK/JNK比值下降(P<0.05)，P-AKT/A