藥代酶和血小板膜受體基因多態(tài)性致氯吡格雷療效差異的實(shí)驗(yàn)室研究.pdf

1、目的：1.檢測負(fù)荷劑量氯吡格雷治療后血小板反應(yīng)性不同的患者的色素酶P450的CYP2C19*2(681G＞A)和血小板膜受體P2Y12(1622A＞G)基因突變攜帶率并探討其臨床影響因素。2.研究氯吡格雷治療患者CYP2C19和P2Y熱點(diǎn)突變導(dǎo)致血小板因藥物耐受而出現(xiàn)高反應(yīng)性的效應(yīng)關(guān)系，探索檢出突變相關(guān)功能改變的臨床適用方法。3.通過光學(xué)免疫比濁法(light transmission aggregometry，LTA)、血栓彈力圖(T

2、hromboelastograph，TEG)、血管擴(kuò)張刺激磷蛋白(Vasodilator-stimulated phosphoprotein，VASP)和血小板表面活性標(biāo)志物CD62P四種血小板功能實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測方法檢測血小板聚集功能并判斷各種方法的氯吡格雷抵抗的檢出率和相關(guān)性。
　　方法：1.TEG檢測負(fù)荷劑量氯吡格雷治療后行經(jīng)皮冠狀動脈介入治療(percutaneous transluminal coronary interven

3、tion， PCI)手術(shù)患者的ADP抑制率，根據(jù)抑制率分組，檢測患者的血液、生化、凝血常規(guī)及生理、病理指標(biāo)。提取患者全血基因組DNA，通過焦磷酸測序方法檢測色素酶P450的CYP2C19*2(681G＞A)和血小板膜受體P2Y1(1622A＞G)基因突變的攜帶率，分析氯吡格雷抵抗與基因突變及其它臨床因素的關(guān)系。2.104例曾接受常規(guī)抗血小板治療，且行PCI術(shù)前服用負(fù)荷劑量(300 mg/d)氯吡格雷的冠狀動脈粥樣硬化性心臟病{冠心病(C

4、oronary heart disease，CAD)}患者，在術(shù)后12～24 h內(nèi)測定血小板功能，通過血栓彈力圖(Thromboelastograph，TEG)檢測血小板抑制率，通過流式細(xì)胞術(shù)檢測CD62p和血管擴(kuò)張刺激磷蛋白(Vasodilator-stimulated phosphoprotein，VASP);焦磷酸測序法測定中國人群藥物代謝酶熱點(diǎn)突變P450的CYP2C19*2(681G＞A)、CYP2C19*3(636G＞A)和

5、血小板膜糖蛋白受體基因P2Y12(52G＞T)、P2Y1(893C＞T)4個(gè)位點(diǎn)基因多態(tài)性。以CYP2C19分型結(jié)果為依據(jù)分為野生組（*1/*1）、雜合突變組（*1/*2）、純合突變組（*2/*2），結(jié)合其他3個(gè)位點(diǎn)突變情況，分析各組氯吡格雷作用下的血小板功能差異。3.選取常規(guī)劑量氯吡格雷服用冠心病患者41例，分別采用LTA、TEG、VASP、CD62P四種方法檢測血小板聚集功能，統(tǒng)計(jì)分析探討其相關(guān)性。
　　結(jié)果：1.氯吡格雷反應(yīng)

6、低下的患者的CYP2C19*2的基因突變攜帶率:TEG檢測的34例反應(yīng)無效組(n=22，64.71％)，27例反應(yīng)低下組(n=15，55.56％)，43例反應(yīng)正常組(n=21，48.84％)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。P2Y1(1622A＞G)基因突變攜帶率:34例反應(yīng)無效組(n=5，14.71％)，27例反應(yīng)低下組(n=8，29.63％)，43例反應(yīng)正常組(n=7，16.28％)。組間生化、血常規(guī)、凝血常規(guī)、TEG檢測各參數(shù)之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意

7、義，生理、病理指標(biāo)在各組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2.野生組個(gè)體的血小板反應(yīng)指數(shù)(PRI)(35.75±23.11％，n=45)，雜合突變組(48.77±24.22％，n=47)，純合突變組(66.73±15.74％，n=12)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=9.170，P＜0.05);野生組CD62p水平為(9.38±11.16％，n=45)，雜合組為(9.45±8.91％，n=47)，純合突變組為(10.87±8.31％，n=12)，差異無統(tǒng)計(jì)

8、學(xué)意義（F=0.087，P＞0.05）;在37例受試個(gè)體中未檢出P2Y1(893C＞T)位點(diǎn)突變，檢出1例P2Y12(52G＞T)位點(diǎn)突變。3.四種不同方法氯吡格雷抵抗的檢出率不同，LTA(24.39％)，VASP(39.02％)，CD62P(14.63％)，TEG(36.59％)，VASP最為敏感，而CD62P檢出率最低，各種方法間相關(guān)性較低。
　　結(jié)論：1.藥代酶和血小板膜受體基因多態(tài)性是氯吡格雷反應(yīng)低下的一個(gè)遺傳因素，但研究