非競爭性NMDA受體拮抗劑引發(fā)小鼠行為學變化及前腦內(nèi)即早基因的表達.pdf

1、目的: 應用親和力不同的NMDA非競爭性受體拮抗劑MK-801(地卓西平馬來酸鹽)和Amantadine(金剛脘胺)作用于小鼠，采用量化的行為學檢測指標，比較兩種藥物引起的行為學表現(xiàn)差異；運用免疫組織化學法檢測腦內(nèi)兩種及早基因蛋白c-Fos和FosB/△FosB蛋白的表達情況和兩種藥物之間的表達差異；用免疫熒光組織化學雙標法對陽性表達神經(jīng)元進行定性分析，試圖根據(jù)兩種藥物所引發(fā)腦功能活動的形態(tài)學表現(xiàn)來探討精神分裂癥各假說之間的內(nèi)在聯(lián)系。

2、 方法: 雄性昆明小鼠156只，隨機分為4組：①生理鹽水組(36只)；②MK-801組(40只)；③Amantadine(5mg/kg)組(40只)；④Amantadine(15mg/kg)組(40只)。各組實驗小鼠給藥前半數(shù)強迫游泳實驗，半數(shù)一次性被動回避反應學習能力訓練；給藥第一天移動行為、刻板行為檢測；給藥第二天分別進行強迫游泳實驗和一次性被動回避反應記憶能力檢測；給藥第三天2h后常規(guī)灌注固定、取腦，做連續(xù)冠狀冰凍切片，片厚

3、40um。將切片分別行FosB/△FosB和c-Fos免疫組織化學染色、連續(xù)貼片。顯微攝像，計算機圖像處理，繪制陽性細胞在前腦的分布模式圖，計數(shù)陽性細胞在各核團的分布密度。結(jié)果采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件分析，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差(mean±SD)表示，實驗組與對照組之間的比較采用t檢驗。以P<0.05表示在統(tǒng)計學上有顯著差異，P<0.01表示在統(tǒng)計學上有極顯著差異。 結(jié)果: 1.MK-801與Amantadine引發(fā)小鼠

4、行為學表現(xiàn)強度不同：MK-801可引起小鼠同時出現(xiàn)較典型的類似精神分裂癥的陽性癥狀、陰性癥狀及認知功能缺陷表現(xiàn)，而Amantadine所引發(fā)的小鼠行為學表現(xiàn)卻與對照組之間無統(tǒng)計學意義。 2.MK-801與Amantadine引發(fā)小鼠腦c-Fos表達的異同：MK-801引起實驗小鼠前腦內(nèi)前額皮質(zhì)、梨狀皮質(zhì)、扣帶皮質(zhì)c-Fos的表達較多，c-Fos表達最集中的部位為丘腦各核團，包括丘腦中線核群、板內(nèi)核群、網(wǎng)狀核等。屬于前腦的隔區(qū)、杏

5、仁核群c-Fos的表達也較多，而嗅結(jié)節(jié)、伏隔核、尾殼核幾乎沒有表達。5mg/kg，15mg/kg劑量的Amantadine引起c-Fos表達呈劑量相關(guān)性，與生理鹽水對照組相比，增加明顯。在丘腦核團，Amantadine引起的c-Fos的表達較少，與MK-801組相比，差別較大。 3.MK-801與Amantadine引發(fā)小鼠腦FosB/△FosB表達的異同：MK-801引起實驗小鼠的前腦內(nèi)FosB/△FosB蛋白較多表達，主要集

6、中在伏隔核、嗅結(jié)節(jié)、隔區(qū)、梨狀皮質(zhì)、終紋床核等核團。5mg/kg,15mg/kg劑量的Amantadine呈劑量相關(guān)性的引起FosB/△FosB蛋白的表達，核團分布與MK-801一致，但在數(shù)量上與MK-801組存在差異。非競爭性NMDA受體拮抗劑引起實驗小鼠FosB/△FosB蛋白的表達在D3R分布集中的核團最多，這為我們了解精神分裂癥中谷氨酸和多巴胺異常尤其是D3R表達增多之間的關(guān)系提供了依據(jù)。 4.MK-801與Amanta