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文檔簡(jiǎn)介
1、鉛是嚴(yán)重危害人類(lèi)健康的環(huán)境污染物,它能誘導(dǎo)金屬硫蛋白(metallothioneins, MTs)的合成,MTs能反映環(huán)境鉛等重金屬的暴露狀況而被廣泛用作重金屬暴露的生物標(biāo)志物。因此,建立靈敏、特異的檢測(cè) M Ts和鉛的新方法,對(duì)評(píng)估環(huán)境重金屬污染和探索 MTs功能具有重要意義。本論文以凝血酶適體(thrombin binding aptamer, TBA)為分子識(shí)別元件,分別建立了雙通道檢測(cè)鉛離子、MTs和以金納米粒子為探針檢測(cè)MTs
2、兩種新方法,建立的方法應(yīng)用于實(shí)際樣品分析,方法可靠,結(jié)果滿(mǎn)意。
本文第二章建立了基于TBA-Pb2+-hemin DNA酶測(cè)定鉛離子和MTs的雙通道方法。在一定條件下,Pb2+誘導(dǎo)TBA形成穩(wěn)定的G-四聚體,再與氯化血紅素(hemin)結(jié)合,形成辣根過(guò)氧化物模擬酶,能催化 H2O2氧化2,2′-連氮-雙(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)(ABTS),生成藍(lán)綠色自由基產(chǎn)物ABTS˙+,導(dǎo)致體系在415nm處吸光度值增加;在此基礎(chǔ)上,
3、調(diào)整體系鉛離子濃度,致使模擬酶活性下降,加入MTs,使之與鉛離子結(jié)合,從而恢復(fù)過(guò)氧化物酶活性。隨著MTs濃度的增加,體系415nm處吸光度增大。據(jù)此,建立了測(cè)定鉛離子和MTs的雙通道檢測(cè)方法。在優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件下, Pb2+濃度在1.07×10-10~2.01×10-9mol·L-1范圍內(nèi)與體系?A值具有良好線(xiàn)性關(guān)系,回歸方程為?A=0.409c(×10-9 mol·L-1)+40.7, r2=0.9932,檢出限為3.21×10-11 m
4、ol·L-1。MTs濃度在5.60×10-8~3.70×10-7mol·L-1范圍與體系?A值呈線(xiàn)性相關(guān),回歸方程為?A=0.133c(×10-7 mol·L-1)+0.068, r2=0.9945;檢出限為1.68×10-8 mol·L-1。
本文第三章建立了TBA-Pb2+-AuNPs比色檢測(cè)MTs的新方法。TBA-Pb2+復(fù)合物溶液中加入MTs時(shí),金納米粒子聚集狀態(tài)改變,使得體系顏色發(fā)生變化,從而建立了檢測(cè)MTs濃度的比
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