金屬硫蛋白的表面增強(qiáng)拉曼光譜研究.pdf

1、金屬硫蛋白(MT)是一類低分子量、高半胱氨酸含量、能結(jié)合大量金屬離子的蛋白質(zhì)。近年來，MT在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用受到越來越多的重視。人們認(rèn)識到MT可能與多種疾病密切相關(guān)，特別是Alzheimer's疾病等一些神經(jīng)退化性疾病。因此，研究金屬硫蛋白與不同金屬結(jié)合的機(jī)理及其構(gòu)型上的變化，對于研究某些疾病的病理和治療方法有著重大的意義。 表面增強(qiáng)拉曼光譜(SERS)具有極高的檢測表面物種的靈敏度，能從分子水平上獲得物質(zhì)詳細(xì)的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成信息。

2、應(yīng)用SERS技術(shù)，可望從分子水平上探究MT復(fù)雜的生理活性。但是，MT分子拉曼散射截面小，易受激光影響碳化分解，雜質(zhì)影響嚴(yán)重。因此，選擇合適的SERS基底和實(shí)驗(yàn)條件，得到重現(xiàn)性好、可信的SERS譜，進(jìn)而從分子水平上研究MT生理特性引起空間結(jié)構(gòu)的變化是一個(gè)極具挑戰(zhàn)的課題。 本論文的工作和獲得成果主要有： 1.探索了幾種獲取MT分子的SERS譜的方法。實(shí)驗(yàn)表明，自組裝Au納米粒子盡管可以制備出SERS活性高、重現(xiàn)性好的SERS

3、基底，但是雜質(zhì)會嚴(yán)重干擾MT的信號。粗糙金電極表面干凈，可獲得可信和有意義的SERS譜圖。通過EDC/NHS交聯(lián)反應(yīng)將MT固定在修飾了MUA的粗糙金表面的方法，使MUA的信號得到了最大增強(qiáng)，但卻得不到明顯的MT的信號，不適合應(yīng)用于MT的SERS研究。 2.研究了直接吸附在粗糙金表面的金屬硫蛋白的SERS譜。結(jié)果表明，MT通過氨基與金作用；apo-MT與金的作用位點(diǎn)受制備方法影響：在溶液中預(yù)制的apo-MT通過半胱氨酸殘基的巰基與