表面增強拉曼光譜檢測β受體激動劑的研究.pdf

1、β受體激動劑即我們熟知的瘦肉精，是一類非法使用在肉類制品上，促進牲畜瘦肉生長、抑制牲畜脂肪合成的苯乙胺類藥物，最為常見的情況是被非法用于豬的飼喂養(yǎng)殖過程中。人食用飼喂了較大劑量瘦肉精的畜產(chǎn)品后可出現(xiàn)惡心、嘔吐、心動過速、肌肉震顫等不良反應(yīng)，對健康帶來嚴重危害。β受體激動劑作為非法添加物添加進飼料時，其使用量往往是正常治療量的數(shù)十倍之多，并且持續(xù)喂藥較長時間（通常連續(xù)使用3周以上），非法飼養(yǎng)者為了縮短牲畜飼養(yǎng)周期，這些牲畜屠宰前往往沒有休

2、藥期，這種情況下β受體激動劑在肌肉和內(nèi)臟器官會產(chǎn)生較高濃度的殘留，而且不易被破壞，給食品安全帶來巨大隱患。目前對動物組織中瘦肉精殘留的檢測方法主要采用色譜技術(shù)以及免疫分析技術(shù)兩類方法，但存在各自局限。
　　本文將表面增強拉曼光譜技術(shù)特點應(yīng)用于β受體激動劑的檢測當中，建立靈敏度高、簡單、快速的β受體激動劑檢測新方法以滿足監(jiān)管，特別是現(xiàn)場快速檢測需要，主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下:
　　1、采用化學還原法，以檸檬酸鈉作為還原劑制備了三

3、種不同粒徑的金納米顆粒溶膠以及一種銀納米顆粒溶膠。然后從粒徑大小、形狀、分布情況對不同納米溶膠進行表征。初步檢測了四種溶膠與β受體激動劑類藥物分子結(jié)合后拉曼信號的增強效果，通過實驗得到三種金溶膠當中加入2mL濃度10mg/mL檸檬酸鈉制備出的金溶膠膠體B尺寸均勻、粒度適中、分散性好，與β受體激動劑結(jié)合后拉曼信號增強效果優(yōu)于另外兩種金溶膠膠體A和膠體C。然后將銀溶膠與金溶膠膠體B對β受體激動劑增強效果進行比較，得到銀溶膠與β受體激動劑結(jié)合

4、后的增強效果優(yōu)于金溶膠，因此選擇銀溶膠作為表面增強活性基底對β受體激動劑進行檢測。
　　2、優(yōu)化表面增強拉曼光譜檢測條件，選取了具有代表性的三種β受體激動劑硫酸特步他林(TS)、鹽酸班布特羅(BH)、鹽酸氯丙那林（CH)為代表進行研究，利用他們具有相同結(jié)構(gòu)部分的特點，找到表面增強拉曼光譜法檢測β受體激動劑的共性方法。通過單因素實驗得到的表面增強拉曼光譜檢測β受體激動劑的最優(yōu)條件為:銀溶膠與待測溶液添加比例3∶2，調(diào)節(jié)pH值為5，N

5、aCl濃度為0.15 mol/L。
　　3、對β受體激動劑水溶液的表面增強拉曼光譜性質(zhì)進行研究。首先對三種常用β受體激動劑的拉曼光譜特征峰進行指認和歸屬，確定β受體激動劑類藥物的拉曼光譜共性特征峰為800-850cm-1，1050 cm-1，1450 cm-1三處，并以此作為β受體激動劑存在的定性依據(jù)。然后以CH為代表，考慮兼顧靈敏性和穩(wěn)定性的需要，選擇800-850cm-1處特征峰為定量分析峰，建立β受體激動劑水溶液濃度與其特征

6、峰拉曼信號強度之間的線性關(guān)系用于定量檢測。得到β受體激動劑水溶液在濃度1-10 mg/L范圍內(nèi)，特征峰拉曼信號強度與待測物濃度之間關(guān)系滿足方程Y=2483X-763.2，相關(guān)系數(shù)為R2=0.997，檢測限為0.1mg/L。
　　4、研究了尿液中主要成分對β受體激動表面增強拉曼光譜的影響，建立尿液中β受體激動檢測方法。排除尿素分子在1005 cm-1的干擾因素后，選擇800-850 cm-1和1450 cm-1處特征峰作為快速鑒定尿

7、液中存在β受體激動劑類藥物的定性依據(jù)?？紤]兼顧靈敏性和排除雜峰干擾的需要，選擇β受體激動劑在800-850cm-1處的拉曼特征峰信號強度與濃度之間建立線性關(guān)系，建立尿液中β受體激動劑的定量檢測方法。以CH為代表，表面增強拉曼光譜檢測CH尿液體系在濃度1-10 mg/L范圍內(nèi)，存在良好的線性相關(guān)關(guān)系，其特征峰強度與濃度之間滿足方程Y=2113X+6006，相關(guān)系數(shù)為R2=0.999，最低檢出限為0.5mg/L。為了進一步對方法進行評價，對

8、比采用高相液相色譜法建立對β受體激動劑的檢測方法。以峰面積對CH濃度建立線性關(guān)系，得到線性方程為Y=0.03018X+0.04667，相關(guān)系數(shù)r=0.999;結(jié)果表明CH濃度在0.5-10mg/L時，濃度與峰面積呈良好的線性關(guān)系。此方法的最小檢出限為0.15mg/L。分別用SERS法和HPLC方法對一批未知濃度的CH盲樣進行檢測，檢測結(jié)果具有很好的一致性。最后從前處理、檢測限、準確性三個方面將兩種方法進行比較，得出表面增強拉曼光譜檢測尿