清熱養(yǎng)心顆粒藥代特性研究.pdf

1、清熱養(yǎng)心顆粒是江蘇省中醫(yī)院制劑，主要由金銀花、黃連、甘草、百合等組成，具有清熱解毒、養(yǎng)心安神之功效，臨床主要用于病毒性心肌炎等的治療。
　　清熱養(yǎng)心顆粒在臨床上療效明確、廣泛應用，但其相關研究甚少。目前多是進行藥理作用和臨床應用方面的研究，其藥代特性方面的研究較為匱乏。本文試圖在本課題組前期工作及文獻總結基礎上對清熱養(yǎng)心顆粒的藥代特性進行研究，旨在為臨床用藥、后續(xù)的科研研究及制劑研發(fā)提供參考依據。建立同時測定清熱養(yǎng)心顆粒中綠原酸、

2、咖啡酸、甘草次酸、氧化苦參堿、薯蕷皂苷元成分含量的方法。采用LC-MS聯(lián)用方法，結果顯示:綠原酸、咖啡酸、甘草次酸、薯蕷皂苷元和氧化苦參堿線性范圍分別為11.60～2970(r=0.9986),3.05～780(r=0.9958),1.10～282(r=0.9991),3.63～930(r=0.9931),0.47～120μg·L-1(r=0.9977)。本法專屬性強、快速靈敏、可用于清熱養(yǎng)心顆粒中綠原酸、咖啡酸、甘草次酸、氧化苦參堿、

3、薯蕷皂苷元成分的含量測定。
　　研究清熱養(yǎng)心顆粒中綠原酸在大鼠、比格犬和人的血漿蛋白結合率。采用血漿平衡透析法，以高效液相色譜法對透析內液與外液中綠原酸的含量進行測定，計算綠原酸與大鼠、比格犬和人的血漿蛋白結合率。綠原酸低中高3個濃度的大鼠血漿蛋白結合率分別為45.4±2.7％、47.7±3.0％、45.8±1.6％;比格犬血漿蛋白結合率分別為40.3±2.1％、42.6±1.8％、42.9±2.3％;人血漿蛋白結合率分別為54.

4、3±2.0％、50.2±2.5％、52.1±3.1％。綠原酸與血漿蛋白具有中等強度的結合，其中與人血漿中的蛋白結合較強，且人＞大鼠＞比格犬。
　　建立大鼠血漿中咖啡酸、綠原酸的UPLC-MS/MS測定方法，并用于其在大鼠體內的藥代動力學研究。SD大鼠6只，灌胃清熱養(yǎng)心顆粒2 g·kg-1，以阿魏酸為內標，用UPLC-MS/MS法測定給藥后血漿中的藥物濃度，并用DAS1.0軟件計算藥動學參數?？Х人?、綠原酸的線性范圍分別為25～80

5、0 ng· mL1(r=0.9965)、11.25～1440 ng·mL-1(r=0.9949)。方法學考察均符合要求。日內、日間變異系數(RSD)均小于9.8％，精密度和準確度等均符合生物樣品分析的要求。大鼠體中咖啡酸藥代動力學參數:T1/2β為(180.42±25.54) min，AUC0-t為(155397.53±3059.14) ng·min·mL-1，Cmax為(729.43±24.56) ng·mL-1;綠原酸藥代動力學參數

6、:T1/2β為(115.94±16.12) min，AUC0-t為(191710.99±7263.26) ng·min·mL-1，Cmax為(1110.32±115.33) ng·mL-1。建立的UPLC-MS/MS分析方法準確靈敏，適于咖啡酸，綠原酸的藥代動力學研究。
　　采用Cocktail探針藥物法評價清熱養(yǎng)心顆粒對大鼠體內5種CYP450亞型酶活性的影響，為臨床聯(lián)合用藥時考察相互作用提供依據。分別選用甲苯磺丁脲、氯唑沙宗、

7、茶堿、奧美拉唑及右美沙芬作為CYP2C9、CYP2E1、CYP1A2、CYP2C19、CYP2D6的探針底物。大鼠灌胃清熱養(yǎng)心顆粒4 g·kg-1，連續(xù)給藥14 d。采用LC-MS/MS測定實驗組和對照組大鼠體內5種混合探針的血藥濃度，計算藥動學參數。清熱養(yǎng)心顆粒連續(xù)給藥14d后，與對照組相比，甲苯磺丁脲和茶堿的代謝明顯加快，氯唑沙宗、奧美拉唑和右美沙芬的代謝無顯著性差異。清熱養(yǎng)心顆粒對大鼠體內CYP2C9、CYP1A2酶有誘導作用，而