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文檔簡介
1、【背景】:雄激素及雄激素受體(Androgen receptor,AR)其對男性生殖功能和精子的發(fā)生至關重要。細胞膜上的AR參與了雄激素的非經典途經作用,但是細胞膜上是否存在AR仍存在爭議,膜上AR的具體作用尚未完全明確。
【目的】:探究雄激素介導的AR胞內轉運分子機制。
【方法】:使用蛋白免疫印跡(Western blot,WB)和免疫熒光技術驗證TM4(一種小鼠睪丸支持細胞系)在睪酮刺激后胞內AR的定位改變。采用
2、磷酸化抗體芯片檢測參與AR膜轉運的蛋白磷酸化,運用各類蛋白激酶拮抗劑驗證并探究各蛋白激酶之間相互作用與AR膜轉運的關系。
【結果】:生理濃度的睪酮(10 nM)可以引起TM4細胞質中AR的快速向細胞膜轉運。我們進一步研究AR快速轉運機制,采用磷酸化抗體芯片,發(fā)現(xiàn)睪酮刺激引起MEK1/2(Ser217/221),Akt(Ser473)和Erk1/2(Thr202/Tyr204)等位點的快速磷酸化。抑制MEK和Akt信號通路可以阻
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