納米羥基磷灰石-賴氨酸二異氰酸酯甘油聚合物-去甲萬(wàn)古霉素復(fù)合體藥物緩釋及預(yù)防骨感染的研究.pdf

1、本文研究目的：研究nHLN的體內(nèi)藥物釋放規(guī)律，觀察其體內(nèi)外的抑菌活性以及在污染、開放性骨缺損修復(fù)治療中的抗感染能力。 研究方法： 1.nHLN 體外抑菌活性的研究方法：以nHLN圓柱體中的NVCM含量為標(biāo)準(zhǔn)，將實(shí)驗(yàn)分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組，分別置于接種有金葡菌/大腸桿菌/綠膿桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株的瓊脂培養(yǎng)基中，觀察測(cè)量抑菌圈變化，比較各組不同的抑菌活性。 2.nHLN體內(nèi)NVCM緩釋特性的研究方法： ①局部用藥組

2、：家兔脛骨骨缺損腔內(nèi)植入ruHLN；于不同時(shí)間點(diǎn)取血并處死家兔后取nHLN周圍骨組織，分別檢測(cè)各時(shí)間點(diǎn)血清及骨組織中NVCM的濃度。 ②全身用藥組：骨缺損腔內(nèi)植入未載藥nHL，術(shù)后靜脈注射NVCM；于相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)取血并處死后，取nHL 周圍骨組織，分別檢測(cè)各時(shí)間點(diǎn)血清及骨組織中NVCM的濃度。分析比較局部用藥組與靜脈用藥組NVCM血清濃度和骨藥濃度的變化特征。 3.nHLN體內(nèi)抑菌活性的研究方法：A、B、C、D 4組鏡頭家

3、兔，脛骨上端骨缺損腔內(nèi)均注入金葡菌。A組缺損骨腔內(nèi)植入nHLN，術(shù)后不用藥：B組植入無菌未載藥nHL，術(shù)后靜脈注射NVCM；C組植入無菌未載藥nHL，術(shù)后不用藥；D組不植入任何物體，術(shù)后亦不用藥。術(shù)后觀察家兔一般情況、感染情況以及組織學(xué)變化情況，分析nHLN 的抗感染性能。 研究結(jié)果： 1.nHLN 體外抑菌活性結(jié)果：Ⅰ組體外對(duì)金葡菌抑菌圈≥10mm持續(xù)時(shí)間為78.00±2.56天，Ⅱ組61.00±1.48天，Ⅲ組43.

4、50±3.00天，Ⅳ組35.50±2.15天，Ⅴ組0.00±0.00天，各組之間差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。Ⅰ組體外對(duì)大腸桿菌抑菌圈≥10mm持續(xù)時(shí)間為2.42±1.51天，Ⅱ組1.25±0.87天，其他各組未見抑菌圈出現(xiàn)。各組對(duì)綠膿桿菌均未出現(xiàn)抑菌圈。 2.nHLN體內(nèi)NVCM緩釋結(jié)果：局部用藥組骨藥濃度和血藥濃度均于1h后出現(xiàn)高峰，骨藥最高濃度達(dá)30.25μg/g，血藥濃度達(dá)2.51μg/ml，骨藥濃度是血藥濃度的1

5、2倍，24小時(shí)達(dá)23倍。骨藥濃度持續(xù)大于甲氧西林耐藥金葡菌(MR)的最小抑菌濃度(1.0μg/ml)4周以上，而血藥一直低于2.51μg/ml。全身用藥組用藥后血藥濃度迅速達(dá)到高峰，在0.25、0.5、1、6、24h血藥濃度(μg/ml)和骨藥濃度 (μg/g)分別為3.64和1.82、2.68和2.82、2.13和1.91、1.32和1.02、0.81和0.83。局部用藥組在0.5h、1h、6h、24h骨藥濃度分別是全身用藥組的8.6

6、、15.8、26.0、22.9倍。 3.nHLN體內(nèi)抑菌活性結(jié)果：A跟B組，C跟D組術(shù)后體溫、體重、白細(xì)胞計(jì)數(shù)差別均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但C、D兩組體溫、白細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯比A、B兩組高，體重輕，差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。C、D兩組感染率明顯比A組高，差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。組織切片顯示各組具有不同的炎癥反應(yīng)，A組最輕，未見化膿性改變，B組稍重，C、D兩組最重，可見大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，多發(fā)膿腫和組織壞死。各組均可見不同程度的纖維組織增生，長(zhǎng)入復(fù)合體內(nèi)