矽肺發(fā)生發(fā)展過程中PDGF、TGF-β變化規(guī)律的研究.pdf

1、[研究目的]
　　 分析炎性細(xì)胞和PDGF、TGF-β在矽肺發(fā)生發(fā)展過程中的變化規(guī)律，探討PDGF、TGF-β在矽肺不同階段誘導(dǎo)痰、BALF和血清中的含量及意義。
　　 [研究方法]
　　 動物實(shí)驗(yàn)：選擇雄性Wistar大鼠84只，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對照組，每組42只。采用非氣管暴露法一次性氣管內(nèi)注入矽塵給大鼠染毒，每組分6個時間點(diǎn)(3，7，14，21,28，60d)，各時間點(diǎn)分別取5只大鼠進(jìn)行在體支氣管肺泡灌洗，

2、另外兩只用多聚甲醛進(jìn)行肺部在體灌注，并用多聚甲醛進(jìn)行外固定。采用酶聯(lián)免疫吸附法測定其中TGF-β，PDGF含量，多聚甲醛固定后的肺組織石蠟包埋，切片，HE染色，普通光鏡下觀察肺組織病理變化，探討TGF-β，PDGF與矽肺炎癥反應(yīng)的關(guān)系。
　　 人群研究：240名金礦工人，其中Ⅰ期矽肺患者80人，Ⅱ期矽肺患者40人，接塵組80人，對照組40人。應(yīng)用痰液誘導(dǎo)技術(shù)取得研究對象的痰液樣本并應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法測定TGF-β，PDGF含量，

3、進(jìn)行痰液涂片，用光學(xué)顯微鏡觀察誘導(dǎo)痰中炎癥細(xì)胞（中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、塵細(xì)胞）數(shù)量變化；同時通過調(diào)查問卷和安環(huán)保的資料調(diào)查各組工人的一般情況并計算出各組工人的累積總粉塵接觸量，分析接塵組和病例組中累積總粉塵接觸量與TGF-β，PDGF含量之間的相關(guān)性關(guān)系。
　　 [研究結(jié)果]
　　 一、矽肺早期TGF-β、PDGF變化的實(shí)驗(yàn)研究
　　 1、大鼠肺組織病理學(xué)改變
　　 對照組肺組織結(jié)構(gòu)基本正常，炎

4、癥反應(yīng)輕微；染塵組第3d后，肺泡壁和肺泡間隔毛細(xì)血管旁中性粒細(xì)胞輕度浸潤，靠近終末氣道的肺泡壁和肺泡間隔有少量巨噬細(xì)胞浸潤；在7d時，部分支氣管上皮細(xì)胞及肺泡上皮細(xì)胞脫落，肺泡間隔增寬且出現(xiàn)了水腫，可見較多的中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞在肺泡腔內(nèi)聚集，；第14天時，肺泡間隔進(jìn)一步增厚，肺泡結(jié)構(gòu)開始遭到破壞，淋巴細(xì)胞開始滲出，漿細(xì)胞滲出增多，仍然有大量巨噬細(xì)胞增生、聚集。第21和28天時，肺泡腔大部分消失，肺泡間隔斷裂，細(xì)胞結(jié)節(jié)數(shù)量多，炎性細(xì)胞主

5、要是淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞，偶爾可以見到成纖維細(xì)胞。第60d時，肺組織結(jié)構(gòu)遭到嚴(yán)重破壞，成纖維細(xì)胞大量出現(xiàn)。
　　 2、大鼠BALF、血清中TGF-β、PDGF含量變化
　　 BALF中的TGF-β，PDGF含量在各時間點(diǎn)較對照組均有不同程度的增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 血清中的TGF-β，PDGF含量在各時間點(diǎn)較對照組均有不同程度的增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 3、大鼠血

6、清和BALF中TGF-β，PDGF的相關(guān)性分析
　　 血清中PDGF和TGF-β存在正相關(guān)關(guān)系(r=0.238，P＜0.05)，BALF中PDGF和TGF-β存在正相關(guān)關(guān)系(r=0.357，P＜0.05)。
　　 二、矽肺不同發(fā)展階段TGF-β、PDGF變化的現(xiàn)場研究
　　 1、誘導(dǎo)痰細(xì)胞學(xué)研究
　　 接塵組、矽肺Ⅰ期組和矽肺Ⅱ期組中性粒細(xì)胞比例均明顯高于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，矽肺Ⅰ

7、期和矽肺Ⅱ期組巨噬細(xì)胞比例明顯低于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；矽肺Ⅰ期和矽肺Ⅱ期組巨噬細(xì)胞比例明顯低于接塵組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；接塵組、矽肺Ⅰ期組和矽肺Ⅱ期組塵細(xì)胞比例明顯高于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；矽肺Ⅰ期組和矽肺Ⅱ期組塵細(xì)胞比例明顯高于接塵組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；接塵組、矽肺Ⅰ期組淋巴細(xì)胞比例明顯低于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；接塵組、矽肺Ⅰ期組淋

8、巴細(xì)胞比例顯著低于矽肺Ⅱ期組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 2、誘導(dǎo)痰中TGF-p，PDGF含量比較
　　 與對照組相比，矽肺Ⅰ期組、矽肺Ⅱ期組的PDGF，TGF-p水平明顯升高，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，與接塵組相比，矽肺I期組、矽肺II期組的PDGF，TGF-p水平明顯升高，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　 3、按累積總粉塵接觸量分組，接塵工人誘導(dǎo)痰中PDGF水平與接塵量存在

9、正相關(guān)關(guān)系，廠值為0.264(P<0.05)，病例組誘導(dǎo)痰中PDGF水平與接塵量不存在相關(guān)關(guān)系，r值為-1.96(P=0.081)；TGF-β水平與接塵量也存在正相關(guān)關(guān)系，r值為0.186(P<0.05)，病例組誘導(dǎo)痰中TGF-p水平與接塵量不存在相關(guān)關(guān)系，，r值為0.074(P=0.513)
　　 [研究結(jié)論]
　　 1、大鼠染矽塵后3～60內(nèi)，肺組織病理學(xué)改變?yōu)樵缙谘装Y反應(yīng)，表現(xiàn)為炎性細(xì)胞浸潤聚集，后期肺泡間隔增厚，

10、成纖維細(xì)胞出現(xiàn)，纖維組織開始增生，肺泡正常組織發(fā)生變化，TGF-p，PDGF在炎癥反應(yīng)過程中發(fā)揮作用。
　　 2、染矽塵大鼠BALF和血清中的TGF-p，PDGF含量隨染塵時間的延長先升高后降低，并與肺組織病理變化一致，可作為反應(yīng)矽肺肺纖維化程度的敏感指標(biāo)。
　　 3、誘導(dǎo)痰中TGF-β，PDGF含量變化能較好地反應(yīng)矽肺進(jìn)展中肺部炎癥反應(yīng)程度的變化，且TGF-p和PDGF含量與接塵量存在弱正相關(guān)關(guān)系，可以作為矽肺早期炎癥