黑龍江省部分地區(qū)綿羊捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(chóng)和蛇形毛圓線蟲(chóng)對(duì)苯丙咪唑類抗藥性的調(diào)查.pdf

1、毛圓科線蟲(chóng)病是羊群易感染的寄生蟲(chóng)病，常給農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)造成了嚴(yán)重的損失。研究黑龍江省綿羊感染毛圓科線蟲(chóng)（Trichostrongylidae）的流行病學(xué)，發(fā)現(xiàn)田間感染的毛圓科線蟲(chóng)對(duì)苯丙咪唑類(Benzimidazoles，BZs)藥物抗藥性，用分子生物學(xué)方法研究的文章相對(duì)較少。目前，國(guó)內(nèi)外已經(jīng)明確的苯丙咪唑抗藥性機(jī)制是β-微管蛋白(β-tubulin)同種型Ⅰ基因(isotyoe-Ⅰ)第200位上密碼子的突變引起的抗藥性。此突變已確定由TTC

2、變?yōu)門(mén)AC，導(dǎo)致了由苯丙氨酸(phenylalanine，Phe)變異為酪氨酸(tyrosine，Tyr)[1，2]，通過(guò)PCR-RFLP技術(shù)方法，調(diào)查黑龍江省部分地區(qū)綿羊場(chǎng)對(duì)苯丙咪唑類抗藥性的捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(chóng)（Haemonchuscontortus，H.contortus和蛇形毛圓線蟲(chóng)（Trichostrongylus colubriformis，T.colubriformis）β-微管蛋白同種Ⅰ型200突變位點(diǎn)的存在現(xiàn)狀。
　　檢

3、測(cè)結(jié)果，發(fā)現(xiàn)齊齊哈爾市依安縣的某羊場(chǎng)在2003年未發(fā)現(xiàn)第200位抗藥性突變點(diǎn)的存在;哈爾濱市太平區(qū)2004年未檢測(cè)到此抗藥性突變位點(diǎn);大慶市羊場(chǎng)2006年的抽查中也未發(fā)現(xiàn)此突變點(diǎn)的存在。在哈爾濱市阿城新華鎮(zhèn)的樣品中2013年和2015年發(fā)現(xiàn)β-微管蛋白第Ⅰ同種型基因200位點(diǎn)上密碼子的突變。黑龍江省三個(gè)城市的131條雄蟲(chóng)樣品，均未檢測(cè)到抗藥性純合子rr。阿城新華鎮(zhèn)在2013年和2015年抗藥性雜合子rS分別為3％(1/30)、16％(2

4、/12)，其他樣品均是敏感性純合子;相應(yīng)的抗藥性等位基因頻率r分別為2％和9％。敏感性等位基因占絕大多數(shù)。檢測(cè)哈爾濱市阿城新華鎮(zhèn)和大慶市2012年-2016年的67條的蛇形毛圓線蟲(chóng)β-微管蛋白200位點(diǎn)的突變，大慶市調(diào)查抽樣的成蟲(chóng)與三期幼蟲(chóng)未發(fā)現(xiàn)抗藥性位點(diǎn)存在。阿城新華鎮(zhèn)只在2013年和2015年檢測(cè)到抗藥性位點(diǎn)，基因型rr分別為0％(0/23)和7％(1/14)，rS分別為9％(2/23)和7％(1/14)，其余地區(qū)檢測(cè)樣品為敏感性純

5、合子?？顾幮缘任换蝾l率r依次為4％和11％，發(fā)現(xiàn)樣品敏感性等位基因頻率居多。
　　檢測(cè)的所有基因頻率與等位基因型頻率的結(jié)果趨于一致。在阿城新華鎮(zhèn)蛇形毛圓線蟲(chóng)β-微管蛋白第200氨基酸抗性位點(diǎn)出現(xiàn)的頻率高于捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(chóng)，并且2015年抗性基因頻率偏高于2013年。檢測(cè)到自然界存在抗藥性純合子rr,試驗(yàn)結(jié)果證明β-微管蛋白第200位突變點(diǎn)在黑龍江省捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(chóng)和蛇形毛圓線蟲(chóng)這兩個(gè)蟲(chóng)株中存在。本論文對(duì)開(kāi)展我國(guó)反芻獸寄生蟲(chóng)對(duì)BZs抗藥性