新生大鼠缺氧缺血性腦病血清UCH-L1蛋白表達(dá)水平的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)通過制備7日齡SD大鼠缺氧缺血性腦損傷（hypoxic-ischemic brain damage，HIBD）模型，對(duì)血清中UCH-L1蛋白的濃度進(jìn)行檢測(cè)，探討(1)血清UCH-L1蛋白在新生SD大鼠缺氧缺血性腦病早期診斷中的價(jià)值。(2)血清UCH-L1蛋白水平與腦損傷嚴(yán)重程度的關(guān)系，為臨床新生兒缺氧缺血性腦病的早期診斷和腦損傷評(píng)估提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：(1)7日齡SD大鼠168只，隨機(jī)分為3組：空白對(duì)照組，假手術(shù)

2、組及HIBD模型組，每一組56只；HIBD組又隨機(jī)分為7個(gè)亞組：6h組、12h組、24h組、48h組、72h組、96h組及7d組，每亞組8只。HIBD模型組采用改良Rice法制備HIBD模型?？瞻讓?duì)照組及假手術(shù)組組內(nèi)分組同HIBD組。(2)實(shí)驗(yàn)前后分別觀察運(yùn)動(dòng)行為學(xué)變化、行改良神經(jīng)功能缺失評(píng)分。(3)HIBD組于6h時(shí)全部先行取血一次，然后各組再按照相同時(shí)間點(diǎn)取血，留取腦組織，觀察腦組織形態(tài)學(xué)變化及腦組織病理學(xué)改變（HE染色）。(4)采

3、用ELISA法（雙抗夾心法）檢測(cè)血清中 UCH-L1表達(dá)水平的變化。
　　結(jié)果：(1)運(yùn)動(dòng)行為學(xué)觀察空白對(duì)照組及假手術(shù)組無異常表現(xiàn)；HIBD組在缺氧過程中出現(xiàn)嚴(yán)重的異常表現(xiàn)。(2)改良神經(jīng)功能缺失評(píng)分空白對(duì)照組及假手術(shù)組評(píng)分均為0；HIBD組在建模后評(píng)分均出現(xiàn)不同程度的變化：其中輕度損傷4.78±1.39（17只），中度損傷9.36±1.92（25只），重度損傷14.63±1.41（14只）。(3)腦組織大體形態(tài)學(xué)觀察空白對(duì)照組及

4、假手術(shù)組腦組織外觀正常。HIBD組建模后腦組織出現(xiàn)不同程度的水腫、液化、壞死改變。(4)腦組織HE染色鏡下觀察空白對(duì)照組及假手術(shù)組神經(jīng)元細(xì)胞未見異常。HIBD組建模后各時(shí)間點(diǎn)左側(cè)腦組織HE染色鏡下觀察神經(jīng)元細(xì)胞出現(xiàn)變性、壞死、凋亡，同時(shí)伴有神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的增生。(5)血清 UCH-L1蛋白水平各時(shí)間點(diǎn)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析空白對(duì)照組組間比較血清UCH-L1蛋白濃度差異，P>0.05，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。假手術(shù)組組間比較血清UCH-L1蛋白濃度差異，P>0.

5、05，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。假手術(shù)組與空白對(duì)照組比較各時(shí)間點(diǎn)血清UCH-L1蛋白濃度，P>0.05，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明假手術(shù)組UCH-L1蛋白濃度表達(dá)穩(wěn)定，未受手術(shù)因素的影響；HIBD組分別與假手術(shù)組和空白對(duì)照組各時(shí)間點(diǎn)比較血清UCH-L1蛋白濃度，P<0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明HIBD后6h血清UCH-L1蛋白表達(dá)水平明顯增高。HIBD組血清UCH-L1蛋白濃度在6h時(shí)隨時(shí)間逐漸升高，至48h到達(dá)峰值后，又隨時(shí)間逐漸下降。(6)HIBD組神

6、經(jīng)功能缺失評(píng)分與血清UCH-L1蛋白水平分析重度損傷UCH-L1蛋白濃度明顯高于輕度損傷和中度損傷，中度損傷 UCH-L1蛋白濃度高于輕度損傷，且差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）；血清UCHL1蛋白與神經(jīng)功能缺失評(píng)分相關(guān)。
　　結(jié)論：(1)新生7日齡SD大鼠缺氧缺血性腦病模型建立成功。(2) UCH-L1蛋白可能是一種新的生物標(biāo)志物，可用于新生SD大鼠缺氧缺血性腦病的早期診斷（6h）。(3)新生大鼠缺氧缺血性腦病血清UCH-L1