姜黃素對(duì)金黃色葡萄球菌引起的急性肺損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制研究.pdf

1、急性肺損傷(acutelunginjury，ALI)是臨床上常見的造成嚴(yán)重的肺彌散功能障礙的急危重癥，嚴(yán)重的ALI或ALI的最終嚴(yán)重階段被定義為急性呼吸窘迫綜合征(acuterespiratorydistresssyndrome，ARDS)。其病理特點(diǎn)為肺泡毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞和肺泡上皮細(xì)胞損傷，表現(xiàn)為廣泛肺水腫和微小肺不張。根據(jù)1994年歐美聯(lián)席會(huì)議提出的ALI/ARDS診斷標(biāo)準(zhǔn)，2005年美國(guó)ALI、ARDS發(fā)病率分別在每年79/10萬

2、和59/10萬，給家庭及社會(huì)帶來了沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。進(jìn)一步研究ALI的分子機(jī)制，探索有效的防治措施，對(duì)提高ALI的生存率，減輕肺組織損傷意義重大。
　　 嚴(yán)重感染是ALI/ARDS的最常見原因。金黃色葡萄球菌(下簡(jiǎn)稱金葡菌，S-A)是臨床最重要的革蘭陽性球菌，具有極強(qiáng)的致病力以及較高致死率。因此如何通過減輕金葡菌誘發(fā)的急性肺組織損傷，是本研究的出發(fā)點(diǎn)。
　　 姜黃素(簡(jiǎn)寫CUR)是從姜黃屬中藥姜黃中提取出來的一種酚性色素，

3、它是一類多效的天然活性物質(zhì)，在藥學(xué)上有廣泛的應(yīng)用價(jià)值，但對(duì)SA誘發(fā)的ALI的作用如何目前并不清楚。本研究主要通過建立體內(nèi)動(dòng)物模型觀察CUR對(duì)SA誘導(dǎo)的ALI的影響及可能機(jī)制，以期為臨床減輕SA誘發(fā)的急性肺損傷尋找新的干預(yù)手段。
　　 目的：建立金黃色葡萄球菌(SA)致小鼠急性肺損傷的動(dòng)物模型，探索姜黃素(CUR)在SA致小鼠急性肺損傷中的作用及其相關(guān)機(jī)制。
　　 方法：8周齡C57/BL6雌鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、SA模型組和

4、CUR干預(yù)組。對(duì)照組氣道滴注PBS(50μl)，SA模型組氣道滴注SA(1×108CFU，50μl)，CUR干預(yù)組為氣道滴注SA前兩小時(shí)行腹腔注射CUR(50mg/kg)。觀察各組小鼠肺組織病理學(xué)、肺血管通透性測(cè)定、肺灌洗液細(xì)胞總數(shù)、中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)分類；采用ELISA檢測(cè)BALF中炎癥因子改變，采用RT-PCR及Q-PCR測(cè)定肺組織炎癥因子及抗炎因子表達(dá)，采用WersternBlot測(cè)定炎癥信號(hào)通路中重要因子的表達(dá)、凝血酶原PAI-1表

5、達(dá)及高遷移率蛋白1(HMGB1)表達(dá)。觀察HMGB1抗體干預(yù)對(duì)小鼠生存率的影響。建立體外SA感染小鼠BMM細(xì)胞模型，WersternBlot檢測(cè)BMM細(xì)胞早期p-IκB表達(dá)。
　　 結(jié)果：本實(shí)驗(yàn)以氣道滴注金葡菌建立小鼠ALI模型，通過對(duì)組織病理學(xué)、肺血管通透性、炎癥因子表達(dá)等多項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)，符合ALI表現(xiàn)，造模成功。與SA模型組比較，CUR干預(yù)組肺組織病理損傷明顯減輕，在SA感染小鼠12h后，肺泡灌洗液細(xì)胞總數(shù)與白細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著降低

6、(P<0.01)；炎癥因子(如KC、MIP-2、INF-α、IL-1β等)下調(diào)(P<0.05)，抗炎因子(如SOCS1、CD200等)顯著上調(diào)(P<0.01)，炎癥通路信號(hào)分子p-Erk1/2下調(diào)。同時(shí)體外實(shí)驗(yàn)顯示CUR可抑制SA感染的BMM細(xì)胞p-IκB蛋白的表達(dá)。且BALF中總蛋白及肺組織凝血酶原PAI-1顯著降低(P<0.01)，肺血管滲透性明顯改善(P<0.01)。此外，體內(nèi)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)CUR還可抑制HMGB1在SA感染后的早期表達(dá)