polyI-C誘導(dǎo)負載HPV E744-62多肽的人臍血Cs抗宮頸癌免疫效應(yīng)研究.pdf

1、PoIyI∶C誘導(dǎo)負載HPVE744-62多肽臍血DCs體外抗宮頸癌的免疫效應(yīng)研究
　　 目的:觀察PolyI:C誘導(dǎo)負載HPVE744-62多肽的人臍血DCs體外抗宮頸癌的免疫效應(yīng)。
　　 方法:采集健康足月妊娠孕婦的臍帶血，密度梯度離心法分離獲得臍血單個核細胞，取貼壁細胞體外經(jīng)rhGM-CSF、rhIL-4誘導(dǎo)培養(yǎng)7天獲DCs。分別用PolyI:C、HPV16E744-62多肽、PolyI:C聯(lián)合HPV16E744-

2、62多肽來刺激DCs，設(shè)未經(jīng)抗原負載的DCs作為對照組。觀察細胞形態(tài)，收集培養(yǎng)9天的各組DCs，采用流式細胞儀檢測DCs相關(guān)表型:CD1α、HLA-DR、CD40和CD83;ELISA法檢測DCs上清中IL-12、IL-10的含量，混合淋巴細胞反應(yīng)測定各組DCs體外刺激T細胞增殖的能力，ELISA法檢測T細胞培養(yǎng)上清液中的IFN-γ含量，MTT法檢測CTL對宮頸癌細胞系CaSki和肝癌細胞系HepG2的殺傷效應(yīng)。
　　 結(jié)果:各

3、組DCs均可誘導(dǎo)分化為一定數(shù)量的具有典型形態(tài)和表型的DCs。以HPV16E744-62多肽聯(lián)合PolyI:C組最高。與未經(jīng)抗原負載的DCs相比，其他各組抗原刺激的DCs數(shù)量、表型CD1α、HLA-DR、CD40和CD83表達率、分泌IL-12的能力、刺激同種異體T細胞增殖能力、分泌IFN-γ水平及激活的CTL對CaSki細胞殺傷力均較高，尤其是以HPV16E744-62多肽聯(lián)合PolyI:C組效果最明顯，同時其分泌IL-10水平亦最低。