骨髓基質(zhì)干細(xì)胞移植途徑對(duì)腦缺血治療的影響.pdf

1、目的：缺血性腦血管病是一種嚴(yán)重危害人體健康和生活質(zhì)量的疾病，其發(fā)病率、致殘率和致死率均很高。隨著社會(huì)人口老齡化，腦血管病的發(fā)病率不斷升高。腦血管病已經(jīng)成為人類死亡的三大主要原因之一，對(duì)缺血性腦損傷的治療方法和治療藥物的研究是當(dāng)前神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)之一。本研究采用骨髓基質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow stromfl cells，MSCs)不同途徑移植來對(duì)大鼠大腦中動(dòng)脈局灶性腦缺血模型進(jìn)行干預(yù)，探討骨髓基質(zhì)干細(xì)胞在急性局灶性腦缺血疾病

2、治療中的作用及其機(jī)制。 方法：利用線拴法制作SD大鼠大腦中動(dòng)脈缺血模型(MCAO)(n=80)，隨機(jī)均分為，缺血自然恢復(fù)組(A組)，缺血+磷酸鹽緩沖液(PBS)對(duì)照組(B組)，缺血+頸內(nèi)動(dòng)脈MSCs組(C組)和缺血+尾靜脈MSCs組(D組)。缺血2h后再灌注，D組將2×106個(gè)MSCs通過尾靜脈移植入腦缺血大鼠體內(nèi)，C組將2×106個(gè)MSCs通過頸內(nèi)動(dòng)脈移植入腦缺血大鼠體內(nèi)，B組經(jīng)頸內(nèi)動(dòng)脈注入等體積的PBS液，不做任何處理。A組

3、麻醉后，做好缺血模型后不作任何治療性處理縫合皮膚。再灌注24小時(shí)后，分別觀察神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分，腦梗死體積，尼氏小體平均灰度，凋亡相關(guān)基因Bcl-2，Bax及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelifl growth factor, VEGF)的表達(dá)。 結(jié)果：神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分：A組為(3.7±0.5)分，B組為(3.6±0.6)明顯高于C組(2.0±0.6)和D組(3.0±0.4)，具有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。而

4、C組(2.0±0.6)與D組(3.0±0.4)相比，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。而B組與A組之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 1、腦梗死體積：A組梗死體積為(208±26)mm3、B組為(210±18)mm3，C組為(130±17)mm3，D組為(174±20)mm3。C、D組梗死體積明顯小于A、B組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，而C組梗死面積又小于D組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。A組和B組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異。 2、病理形

5、態(tài)學(xué)： 1) 尼氏小體：尼氏體的平均灰度值與細(xì)胞內(nèi)尼氏體含量呈反比：平均灰度值越低，其細(xì)胞內(nèi)尼氏體含量越高。A組為(178．18±21．66)，B組為(163．64±20．29)，C組為(124．36±14．85)，D組為(149．73±10．96)。C組尼氏體的平均灰度值最低，尼氏體含量最高。A組尼氏體的平均灰度值最高，尼氏體含量最低。C組和D組的平均灰度值與A組、B組相比明顯下降，說明其細(xì)胞內(nèi)尼氏體含量有明顯提高，在統(tǒng)計(jì)學(xué)上

6、有差異(P<0．01)。而C組的平均灰度值與D組相比明顯下降，在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有差異(P<0．01．)，A組與B組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2) Bcl-2免疫組化染色：Bcl-2的過度表達(dá)具有神經(jīng)元保護(hù)作用。Bcl-2的表達(dá)A組為(0．39±0．04)，B組為(0．41±0．03)，C組為(0．68±0．11)，D組為(0．55±0．02)。以C組為最高，與其他各組相比均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0．05)，但A、B兩組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

7、 3) Bax免疫組化染色：細(xì)胞受損時(shí)Bax表達(dá)增強(qiáng)。Bax表達(dá)A組為(0．54±0．05)，B組為(0．45±0．03)，C組為(0．27±0．03)，D組為(0．34±0．04)。以A組表達(dá)最強(qiáng)，B組次之，C組最低，C組與A、B，D組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0．05)，但A、B兩組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 4)VEGF的表達(dá)：A組為(3．345±1．400，％)，B組為(3．940±0．945，％)，C組為(7．207±2．245，

8、％)，D組為(5．856±1．920，％)。MSCs移植后，在腦內(nèi)存活、遷徙、分泌血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)，與其他組相比，C組VEGF含量明顯增高，與各組相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0．05)。 結(jié)論： 1、移植MSCs治療缺血性腦損傷具有較好的療效，能夠明顯改善神經(jīng)功能缺損。 2、移植MSCs治療缺血性腦損傷能夠明顯縮小梗死體積，減輕神經(jīng)細(xì)胞水腫，改善神經(jīng)細(xì)胞代謝。 3、同樣條件下頸內(nèi)動(dòng)脈移植MSC