霧化吸入布地奈德對博萊霉素致肺纖維化大鼠支氣管肺泡灌洗液中TGF-β-,1-、TNF-α及PDGF-BB的影響.pdf

1、目的:探討霧化吸入布地奈德對博萊霉素致肺纖維化大鼠支氣管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid，BALF)中轉(zhuǎn)化生長因子-β1(transforming growth factor-β1，TGF-B1)、腫瘤壞死因子(tumornecrosis factor-α，TNF-α)及血小板衍化生長因子(platelet-derivedgrowth factor-BB，PDGF-BB)的影響，探討其抗纖維化的作用機(jī)

2、制。 方法:45只Wistar雌性大鼠隨機(jī)分為生理鹽水對照組(controlgroup，CG組)、肺纖維化模型組(model group，MG組)、布地奈德干預(yù)組(budesonide group，BG組)，每組15只:(1)CG組，氣管內(nèi)灌注0.2ml(1ml/kg體重)生理鹽水(NS)，隨后每日開始給予霧化吸入NS(0.5 mg/kg體重)進(jìn)行干預(yù)； (2)MG組，氣管內(nèi)灌注BLM(5mg/kg，用生理鹽水配制BLM溶液濃度

3、為5mg/ml誘導(dǎo)肺纖維化，隨后每日用NS(劑量與用法同CG組)進(jìn)行干預(yù)；(3)BG組，氣管內(nèi)灌注BLM(劑量與用法同MG組)，隨后每日開始給予霧化吸入布地奈德(0.5 mg/kg體重)進(jìn)行干預(yù)。各組動物于氣管內(nèi)灌注后第7、14和28天各分別處死5只大鼠，收集肺組織作切片行HE及Masson染色，觀察其病理變化、判斷肺組織肺泡炎及肺纖維化程度、肺組織勻漿測定羥脯氨酸含量；右肺支氣管肺泡灌沈(BAL)，進(jìn)行細(xì)胞分類、計數(shù)；以及用酶聯(lián)免疫吸

4、附實驗法(ELISA法)測定BALF中TGF-β1、TNF-α及PDGF-BB的含量。 結(jié)果:(1)病理切片觀察CG組肺泡腔內(nèi)未見炎性細(xì)胞浸潤，肺泡間隔無增寬。MG組:第7天時肺泡炎最重，肺泡腔內(nèi)可見大量炎性細(xì)胞浸潤；14天時肺泡腔內(nèi)炎癥細(xì)胞明顯減少，膠原明顯增多，肺泡結(jié)構(gòu)破壞，肺泡隔增寬；28天肺纖維化程度加重，部分肺泡腔消失，形成嚴(yán)重纖維化。BG組肺泡炎和纖維化程度明顯低于同期MG組； (2)支氣管肺泡灌洗液中細(xì)胞計數(shù)及分類

5、，MG組BALF中細(xì)胞總數(shù)在第7天組達(dá)到高峰，在第14天和第28天開始回降，與CG組比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；BG組7天、14天與MG相應(yīng)時間點比較巨噬細(xì)胞比例均增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；MG組、BG組與CG組比較，中性粒細(xì)胞比例均增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，BG7天、14天組與MG相應(yīng)天組比較，中性粒細(xì)胞比例均減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。MG組、BG組與CG組比較，淋巴細(xì)胞比例均增加，差異有統(tǒng)計學(xué)

6、意義(P<0.05)。(3)MG組肺組織中HYP含量在第7天開始升高，第14、28天進(jìn)行性增高，與CG組相比較，都明顯高于CG組(P<0.01)；BG組肺組織中HYP含量在第7天，14天和28天均低于MG組(P<0.05)；(4)MG組、BG組各時間點肺泡灌洗液中TGF-β、TNF-α和PDGF-BB含量、均明顯高于CG組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0,05)；BG組與MG組比較:BG組第7、14天BALF中TGF-β、PDGF-BB含量低

7、于MG組(P<0.05)，第28天含量與MG組差異不大(P>0.05)。BG組第7、14、28天BALF中TNF-α含量均低于MG組(P<0.05)。 結(jié)論:1.模型組和藥物組的肺泡灌洗液中的巨噬細(xì)胞比例下降、中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞比例明顯增加，提示三種細(xì)胞均參與了肺損傷和肺纖維化，而霧化吸入布地奈德能夠減少肺泡炎癥，提高肺泡AM比例，減少中性粒細(xì)胞的滲出；2.霧化吸入布地奈德能明顯降低肺組織中羥脯氨酸(HYP)的含量，從而降低肺

8、組織膠原蛋白的含量。3. 霧化吸入布地奈德能夠減少肺泡灌洗液中的細(xì)胞因子TGF-β1、TNF-α和PDGF-BB的含量，在早中期較模型組均有下降，推測藥物可能抑制以巨噬細(xì)胞為主的炎性細(xì)胞細(xì)胞增殖，使早期的肺泡炎程度減輕；4.藥物組在后期亦能減少肺纖維化的形成，能延緩肺纖維化的進(jìn)程，其機(jī)制可能是通過在抑制以巨噬細(xì)胞為主的炎性細(xì)胞細(xì)胞增殖，TGF-β1、TNF-α和PDGF-BB的生成減少，從而減少肺組織膠原的沉積并達(dá)到其抗纖維化的