EGCG對博萊霉素致大鼠肺纖維化干預(yù)作用的分子機(jī)制研究.pdf

1、目的:
　　 觀察表沒食子兒茶素沒食子酸酯（epigallocatechingallate，EGCG）對博萊霉素(bleomycin，BLM)致大鼠肺纖維化的防治作用及其分子機(jī)制。
　　 方法:
　　 SD大鼠48只隨機(jī)分為6組:正常組，模型組，EGCG大、中、小劑量組，陽性藥對照組（醋酸潑尼松組）;每組大鼠8只，除正常組大鼠外，其余各組大鼠采用氣管內(nèi)注入博萊霉素制備肺纖維化模型，造模第二天起，治療組分別灌服EG

2、CG大、中、小劑量（100、50、25mg.kg-1.d-1）和醋酸潑尼松（3.34mg.kg-1.d-1），正常組和模型組大鼠給予等體積的蒸餾水，每天一次，實(shí)驗(yàn)過程中記錄體重及行為狀態(tài)。28天后，各組大鼠麻醉后腹主動脈抽血處死，取肺組織作病理形態(tài)學(xué)觀察大鼠肺泡炎及肺纖維化程度并測定其羥脯氨酸(HYP)含量。測定肺組織及血清中總抗氧化能力(T-AOC)、總超氧化物歧化酶（T=SOD）的水平；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測肺灌洗液中腫

3、瘤壞死因子-α（TNF-a）和白介素-6(IL-6)的含量；反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）法檢測肺組織轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)、Smad2、Smad7、平滑肌肌動蛋-α(α-SMA)、Ⅰ型膠原(COL-I)mRNA的表達(dá)；Western-blot檢測肺組織中α-SMA、COL-Ⅰ，轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)，Smad2，Smad7蛋白的表達(dá)；實(shí)時定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RealtimePCR)檢測肺組織中微小RNA-

4、21(miR-21)的表達(dá)。
　　 結(jié)果:
　　 一般行為狀態(tài)觀察結(jié)果:與模型組大鼠相比，EGCG各劑量組大鼠外觀行為狀態(tài)正常，體重增加(P＜0.05);肺組織病理學(xué)觀察結(jié)果:EGCG各劑量組大鼠肺組織肺泡炎及肺纖維化程度明顯減輕(P＜0.05，P＜0.01);生化指標(biāo)檢測顯示:EGCG能顯著降低大鼠肺組織中HYP含量(P＜0.01)，EGCG能顯著增強(qiáng)大鼠肺組織和血清中T-AOC能力和T-SOD活力(P＜0.05，P＜

5、0.01);肺泡灌洗檢測結(jié)果:EGCG各劑量組肺泡中TNF-α含量、IL-6含量明顯降低(P＜0.05);RT-PCR結(jié)果顯示:EGCG各劑量組大鼠肺組織中TGF-β1、Smad2、α-SMA、COL-ImRNA表達(dá)明顯下調(diào)(P＜0.05，P＜0.01)，Smad7mRNA表達(dá)顯著上調(diào)(P＜0.01);Westernblot結(jié)果顯示:EGCG各劑量組大鼠肺組織中TGF-β1、Smad2、α-SMA、COL-I蛋白表達(dá)明顯下調(diào)(P＜0.0