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文檔簡介
1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模河^察細(xì)胞外pH值梯度改變(pH7.4~6.4,7.4~8.4)對(duì)大鼠冠狀動(dòng)脈環(huán)張力的影響并探討其機(jī)制。
實(shí)驗(yàn)方法:大鼠斷頭處死后迅速分離出冠狀動(dòng)脈,并固定于離體微動(dòng)脈環(huán)張力測(cè)定儀的換能器上,使用PowerLab記錄冠狀動(dòng)脈環(huán)張力變化。觀察pH值梯度降低(pH=7.4,7.2,7.0,6.8,6.6,6.4)對(duì)大鼠冠脈環(huán)張力的影響;觀察pH值梯度升高(pH=7.4,7.6,7.8,8.0,8.2,8.4)對(duì)大鼠冠脈環(huán)張
2、力的影響;孵育工具藥物NPPB,AM,KB-R7943,LaCl3,L-NAME和改變?cè)∫衡}離子以探究氯通道,Na+/H+交換,Na+/Ca2+交換,Ca2+通道,一氧化氮,及外鈣內(nèi)流內(nèi)鈣釋放是否參與前述改變。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
1、靜息狀態(tài)下,大鼠冠狀動(dòng)脈環(huán)的基礎(chǔ)張力隨細(xì)胞外環(huán)境pH值的梯度降低(pH7.4~6.4)而逐漸升高。偏酸性環(huán)境下(pH值=7.2,7.0,6.8,6.6,6.4時(shí))冠狀動(dòng)脈環(huán)的張力分別為(0.0
3、4±0.01)mN,(0.29±0.05)mN,(2.71±0.34)mN,(2.72±0.37)mN,(2.66±0.41)mN。為此我們選定pH值為6.8來研究偏酸性環(huán)境下大鼠冠狀動(dòng)脈環(huán)收縮的機(jī)制。
2、靜息狀態(tài)下,pH值梯度升高(pH7.4~8.4)對(duì)大鼠冠狀動(dòng)脈環(huán)的基礎(chǔ)張力無影響。偏堿性環(huán)境下(pH值=7.6,7.8,8.0,8.2,8.4時(shí))冠狀動(dòng)脈環(huán)的張力分別為(0.03±0.01)mN,(0.07±0.01)mN
4、,(0.09±0.03)mN,(0.13±0.02)mN,(0.15±0.02)mN。
3、孵育3×10-2mmol/l的NPPB可以顯著減弱酸性環(huán)境誘導(dǎo)的大鼠冠狀動(dòng)脈環(huán)收縮,冠狀動(dòng)脈環(huán)的張力分別為(2.99±0.42)mNVS(1.07±0.12)mN,P=0.001。
4、孵育3×10-2mmol/l的AM可以顯著減弱酸性環(huán)境誘導(dǎo)的大鼠冠狀動(dòng)脈環(huán)收縮,冠狀動(dòng)脈環(huán)的張力分別為(2.77±0.47)mNVS(2.13
5、±0.35)mN,P=0.026。
5、孵育1×10-2mmol/l的KB-R7943可以顯著減弱酸性環(huán)境誘導(dǎo)的大鼠冠狀動(dòng)脈環(huán)收縮,冠狀動(dòng)脈環(huán)的張力分別為(2.59±0.53)VS(1.04±0.14)mN,P=0.001。
6、孵育5mmol/l的LaCl3可以顯著減弱酸性環(huán)境誘導(dǎo)的大鼠冠狀動(dòng)脈環(huán)收縮,冠狀動(dòng)脈環(huán)的張力分別為(2.89±0.65)mNVS(0.11±0.02)mN,P=0.001。
7、孵
6、育0.1mmol/l的L-NAME可以顯著增強(qiáng)酸性環(huán)境誘導(dǎo)的大鼠冠狀動(dòng)脈環(huán)收縮,冠狀動(dòng)脈環(huán)的張力分別為(2.75±0.22)mNVS(4.17±1.06)mN,P=0.02。
8、浴液中無鈣(Ca2+-free)時(shí),酸性環(huán)境輕僅微收縮大鼠冠狀動(dòng)脈環(huán),冠狀動(dòng)脈環(huán)的張力為(2.55±0.29)mNVS(0.21±0.02)mN,P=0.001;浴液鈣離子正常(2.5mM)時(shí),恢復(fù)了酸性環(huán)境對(duì)大鼠冠狀動(dòng)脈環(huán)的收縮,(2.3±0.31
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