葉酸介導白蛋白包載長春堿納米粒的制備工藝優(yōu)化、表征及體外活性檢測.pdf

1、長春堿存在于夾竹桃科植物長春花（Catharanthus roseus）中，是目前臨床上最重要的抗腫瘤藥物之一，已經(jīng)廣泛應用于大多數(shù)癌癥的治療，特別是在何杰金氏病和絨毛膜癌，同時能夠有效地抑制淋巴肉瘤、卵巢癌、惡性黑色素瘤和急性白血病。
　　溶解度是對藥物進行評價的重要性質(zhì)之一。長春堿幾乎不溶于水，目前，為解決長春堿水溶性差的問題，已將其制備成硫酸鹽形式，即硫酸長春堿。然而，硫酸長春堿仍存在嚴重的缺點，如劑量毒性，導致許多不良反應

2、，如抑制骨髓，白細胞減少、嘔吐和神經(jīng)毒性等。此外，非靶向性是硫酸長春堿的另一個缺點，盡管硫酸長春堿在癌癥治療上顯示出較好的療效，但同時損害了人體正常組織。納米載體材料主要應用于藥物靶向和緩釋制劑的制備，具有三大效應，即表面和界面效應、量子尺寸效應和小尺寸效應。由于納米載體材料尺寸小、比表面積大、表面原子所占比例大、表面能高，因此不僅增大其負載藥物的溶解度，同時提高了生物利用度。由于載體包裹藥物進入人體后，可主動搜索并攻擊癌細胞，因此這為

3、納米藥物的研究提供了一個新的研究途徑。
　　本課題針對長春堿(VLB)水溶性差，在臨床應用上毒副作用大、無靶向性等缺點，利用去溶劑化-化學交聯(lián)法制備了VLB納米靶向制劑。課題內(nèi)容包括應用中心點試驗設(shè)計法(Central Composite Designs，CCD)對牛血清白蛋白(BSA)包裹長春堿進行制備工藝的優(yōu)化;運用激光粒度儀、高效液相色譜儀、傅立葉紅外光譜儀等手段，檢測牛血清白蛋白包載長春堿納米粒(VLB-BSANP)和葉酸

4、介導牛血清白蛋白包載長春堿納米粒(FA-VLB-BSANP)的各項物理表征及穩(wěn)定性;通過體外人卵巢癌HO-8910、人肝癌SMMC-7721和人肺癌A549細胞系，應用MTT檢測法和激光共聚焦檢測對長春堿納米靶向制劑進行體外活性分析。
　　本研究得出:
　　1、制備粒徑為151.4 nm VLB-BSANP的最優(yōu)實驗條件為:BSA濃度7.75 mg/mL，乙醇與水體積比達到4.25，理論載藥量為40％，pH對本實驗響應值均無

5、影響。
　　2、考察了靶向制劑FA-VLB-BSANP的粒徑、載藥量、包封率及穩(wěn)定性等。結(jié)果表明，F(xiàn)A-VLB-BSANP粒徑達到納米級，粒子分布均勻，較好的載藥量和包封率，且穩(wěn)定性良好。
　　3、FA-VLB-BSANP在最初的13h內(nèi)藥物傳遞系統(tǒng)出現(xiàn)突釋，之后緩慢釋放至77h，分別釋放出所含VLB的34％和69％，進一步證明了FA-BSANP-VLB的緩釋特性。
　　4、FA-VLB-BSANP的體外抗癌活性實驗<

6、br>　　FA-VLB-BSANP組、VLB-BSANP組及VLB原藥組對SMMC-7721、HO-8910和A549的細胞抑制率，均呈濃度依賴性，且相同濃度的FA-VLB-BSANP組、VLB-BSANP組及VLB原藥組相比，F(xiàn)A-VLB-BSANP組細胞抑制率最高。
　　5、靶向制劑FA-VLB-BSANP能被腫瘤對腫瘤細胞定向攝取，靶向性明顯。
　　通過以上實驗結(jié)果，證明本實驗所制備的FA-VLB-BSANP粒徑達到納