葉酸介導西紫杉醇牛血清白蛋白腫瘤靶向納米粒制備、表征及體外釋放性能評價.pdf

1、多西紫杉醇( Docetaxel)是建立在紫杉醇基礎上的第二代紫杉烷類抗癌藥的代表，在抗癌試驗中多西紫杉醇的活性比紫杉醇的活性要高。這種藥物不僅僅只針對卵巢癌、非小細胞肺癌和乳腺癌具有良好的療效，而且對前列腺癌、胰癌、和多種軟組織腫瘤也都具有良好的療效，是目前臨床化療藥物的一線用藥。但是目前多西紫杉醇制劑還存在一些缺點：非水溶性、無靶向性、致敏性和毒副作用。
　　 本文針對多西紫杉醇制劑水溶性差和無靶向性缺點進行靶向水溶性制劑的

2、研究。嘗試了常規(guī)反溶劑法、機械粉碎方法、超聲乳化法和超臨界流體反溶劑法制備多西紫杉醇納米藥物，但由于其各自的局限性無法制備出滿意的納米藥物。最終選擇去溶劑化-化學交聯(lián)法制備DT-BSA-NPs來解決多西紫杉醇水溶性這一難題。用葉酸偶聯(lián)DT-BSA-NPs解決其靶向性問題。
　　 通過對制備過程中的重要影響因素進行考察，選取6個因素的可行范圍，并利用Design-expert軟件進行析因數據優(yōu)化，對實驗中的白蛋白濃度、多西紫杉醇濃

3、度、醇水比例、交聯(lián)比、滴速等重要條件進行分析，最終得優(yōu)化條件：BSA濃度為35.1me/mL，DT濃度為3.96mg/mL，乙醇和水的比例為2.99，乙醇的滴加速度為0.5mL/min，攪拌時間為36h，戊二醛和白蛋白交聯(lián)比例為1。此條件預計結果為：粒徑181.65 nm，最大包封率為26.3％，最大載藥量12.43%。
　　 經過認證試驗，用激光粒度儀測量了DT-BSA-NPs的粒徑和電位，得出DT-BSA-NPs的粒徑188

4、nm、電位-39.76mV;用紫外分光光度計測出包封率為30.63%、載藥量13.92%，確定得到的產品符合要求。
　　 之后用葉酸活性酯偶聯(lián)制備成功的DT-BSA-NPs得到FA-DT-BSA-NPs，使其具有靶向性。通過對FA-DT-BSA-NPs進行紫外分光光度計檢測，得到白蛋白摩爾數比偶聯(lián)葉酸摩爾數為1：2.56。對FA-DT-BSA-NPs抽三個樣品進行檢驗其粒徑在190nm左右，電位-30mV左右，綜合掃描電鏡的超微

5、圖片，得知FA-DT-BSA-NPs的平均粒徑要比DT-BSA-NPs略大，以無序的晶體狀多西紫杉醇，被包裹后形成球狀，且通過X-ray圖譜發(fā)現(xiàn)FA-DT-BSA-NPs和多西紫杉醇峰值明顯不同，說明多西紫杉醇晶型有改變。在紅外光譜下可以清晰看到FA-DT-BSA-NPs在1652cm-1處有明顯的特征峰，暗示有N-O化學鍵生成，不是單純的物理混合。經過對干粉FA-DT-BSA-NPs復溶12小時的觀察與檢測。其各項數據未發(fā)生較大變化，

6、基本一樣。證明經復溶后的FA-DT-BSA-NPs在12小時內保持了良好的穩(wěn)定性。經檢測分散均勻的納米微球，載藥量和包封率無明顯變化。用粒徑201nm，包封率32.9%，載藥量為14.8%的藥物做體外釋放實驗。在最初的24 h內藥物傳遞速度比較快，之后緩慢釋放至96h。證明其具有緩釋性質。
　　 通過以上實驗和分析，證實本實驗得到的最終FA-DT-BSA-NPs產品粒徑達到過0.22uM膜滅菌要求，并且分布均勻，形態(tài)規(guī)整。成功的